ØMikrob icmasının profilini çıxarmaq üçün izolyasiya və becərilməz
ØƏtraf mühit nümunələrində az bol olan növlərin aşkar edilməsində yüksək dəqiqlik
Ø“Meta-” ideyası bütün bioloji xüsusiyyətləri funksional səviyyədə, növ səviyyəsində və gen səviyyəsində birləşdirir ki, bu da reallığa daha yaxın olan dinamik mənzərəni əks etdirir.
ØBMK 10.000-dən çox nümunə ilə müxtəlif nümunə növləri üzrə böyük təcrübə toplayır.
SıralamaPlatforma | Kitabxana | Tövsiyə olunan məlumat gəliri | Təxmini dönüş vaxtı |
Illumina NovaSeq 6000 | PE250 | 50K/100K/300K Teqlər | 30 Gün |
üXam məlumatların keyfiyyətinə nəzarət
üMetagenom montajı
üQeyri-ehtiyatsız gen dəsti və annotasiya
üNövlərin müxtəlifliyinin təhlili
üGenetik funksiyaların müxtəlifliyinin təhlili
üQruplararası təhlil
üEksperimental amillərə qarşı assosiasiya təhlili
üçünDNT ekstraktları:
Nümunə növü | Məbləğ | Konsentrasiya | Saflıq |
DNT ekstraktları | > 30 ng | > 1 ng/μl | OD260/280= 1,6-2,5 |
Ətraf mühit nümunələri üçün:
Nümunə növü | Tövsiyə olunan nümunə götürmə proseduru |
Torpaq | Nümunə miqdarı: təqribən.5 q;Qalan qurumuş maddə səthdən çıxarılmalıdır;Böyük parçaları doğrayın və 2 mm filtrdən keçirin;Rezervasiya üçün steril EP-borucuqda və ya cyrotubda aliquot nümunələri. |
Nəcis | Nümunə miqdarı: təqribən.5 q;Rezervasiya üçün steril EP-boru və ya kriotubedə nümunələri toplayın və alikvotlayın. |
Bağırsaq məzmunu | Nümunələr aseptik şəraitdə emal edilməlidir.Toplanmış toxumaları PBS ilə yuyun;PBS-ni sentrifuqa edin və çöküntünü EP borularında toplayın. |
çamur | Nümunə miqdarı: təqribən.5 q;Şlam nümunəsini rezervasiya üçün steril EP-boruya və ya kriotubaya toplayın və alikvotun |
Su obyekti | Kran suyu, quyu suyu və s. kimi məhdud miqdarda mikrob olan nümunə üçün ən azı 1 L su toplayın və membrandakı mikrobi zənginləşdirmək üçün 0,22 μm filtrdən keçirin.Membranı steril boruda saxlayın. |
Dəri | Dərinin səthini steril pambıq çubuq və ya cərrahi bıçaqla diqqətlə qırın və steril boruya qoyun. |
Nümunələri maye azotda 3-4 saat dondurun və maye azotda və ya -80 dərəcədən uzunmüddətli rezervasiyada saxlayın.Quru buz ilə nümunə göndərmə tələb olunur.
1.Histoqram: Növlərin paylanması
2. KEGG metabolik yollarına şərh edilmiş funksional genlər
3.İstilik xəritəsi: Nisbi gen bolluğuna əsaslanan diferensial funksiyalar4.CARD antibiotik müqavimət genlərinin sirkləri
BMK işi
Torpaq-mangrov kök davamlılığı boyunca antibiotik müqavimət genlərinin və bakterial patogenlərin yayılması
Nəşr olundu:Təhlükəli Materiallar Jurnalı, 2021
Ardıcıllıq strategiyası:
Materiallar: Mangrov kökü ilə əlaqəli nümunələrin dörd fraqmentinin DNT ekstraktları: əkilməmiş torpaq, rizosfer, episfer və endosfer bölmələri
Platforma: Illumina HiSeq 2500
Hədəflər: Metagenom
16S rRNA geni V3-V4 bölgəsi
Əsas nəticələr
Antibiotik müqavimət genlərinin (ARG) torpaqdan bitkilərə yayılmasının öyrənilməsi məqsədilə manqrov tinglərinin torpaq-kök kontinuumunda metagenomik ardıcıllıq və metabarkodlama profili işlənmişdir.Metagenomik məlumatlar, antibiotik müqavimət genlərinin 91,4% -nin yuxarıda qeyd olunan bütün dörd torpaq bölməsində müəyyən edildiyini və davamlı bir moda nümayiş etdirdiyini ortaya qoydu.16S rRNA amplikon ardıcıllığı 346 növü təmsil edən 29,285 ardıcıllıq yaratdı.Amplikon ardıcıllığı ilə növlərin profilləşdirilməsi ilə birləşərək, bu yayılmanın köklə əlaqəli mikrobiotadan asılı olmadığı aşkar edildi, lakin bu, genetik elementlərin mobilliyi ilə asanlaşdırıla bilər.Bu tədqiqat qarşılıqlı əlaqəli torpaq-kök kontinuumu vasitəsilə torpaqdan bitkilərə ARG və patogenlərin axını müəyyən etdi.
İstinad
Wang, C., Hu, R., Strong, PJ, Zhuang, W., & Shu, L..(2020).Torpaq-mangrov kök davamlılığı boyunca antibiotik müqavimət genlərinin və bakterial patogenlərin yayılması.Təhlükəli Materiallar Jurnalı, 408, 124985.