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Sequenziamentu di Ampliconi 16S/18S/ITS-PacBio

I geni rRNA 16S è 18S, inseme cù a regione Internal Transcribed Spacer (ITS), servenu cum'è marcatori d'impronte moleculari pivotali per via di a so cumbinazione di regioni altamente cunservate è ipervariabili, ciò chì li rende strumenti preziosi per caratterizà l'organismi procarioti è eucarioti. L'amplificazione è u sequenziamentu di queste regioni offrenu un approcciu senza isolamentu per investigà a cumpusizione è a diversità microbica in vari ecosistemi. Mentre u sequenziamentu Illumina tipicamente mira à regioni ipervariabili corte cum'è V3-V4 di 16S è ITS1, hè statu dimustratu chì una annotazione tassonomica superiore hè ottenibile sequenziendu a lunghezza completa di 16S, 18S è ITS. Questu approcciu cumpletu si traduce in percentuali più elevate di sequenze classificate accuratamente, ottenendu un livellu di risoluzione chì si estende à l'identificazione di e spezie. A piattaforma di sequenziamentu Single-Molecule Real-Time (SMRT) di PacBio si distingue per furnisce letture lunghe (HiFi) altamente precise chì coprenu l'ampliconi à lunghezza completa, rivalendu cù a precisione di u sequenziamentu Illumina. Questa capacità permette à i circadori di ottene un vantaghju senza paragone: una vista panoramica di u paisaghju geneticu. A cupertura estesa eleva significativamente a risoluzione in l'annotazione di e spezie, in particulare in e cumunità batteriche o fungine, permettendu una comprensione più profonda di e cumplessità di e pupulazioni microbiche.


Dettagli di u serviziu

Bioinformatica

Risultati di a Dimostrazione

Publicazioni in evidenza

Funzioni di serviziu

● Piattaforma di sequenziamentu: PacBio Revio

● Modu di sequenziamentu: CCS (letture HiFi)

● Amplificazione di a regione di destinazione seguita da un ligame in tandem di ampliconi prima di a preparazione di a biblioteca di campane HiFi SMRT

Vantaghji di u serviziu

Risoluzione tassonomica più alta: Tsequenziamentu di ampliconi corti di Han,permettendu tassi di classificazione OTU più alti à u livellu di spezie.

Chjama di basa assai precisaSequenziamentu in modu CCS PacBio (letture HiFi).

Senza isolamentuIdentificazione rapida di a cumpusizione microbica in campioni ambientali.

Ampiamente applicabileStudi di cumunità microbiche diverse.

Analisi bioinformatica cumpletaL'ultimu pacchettu QIIME2 (intuizione quantitativa di l'ecologia microbiana) cù diverse analisi in termini di basa di dati, annotazione, OTU/ASV.

Una vasta cumpetenzaCù millaie di prughjetti di sequenziamentu di ampliconi realizati ogni annu, BMKGENE porta più di una decina d'anni di sperienza, una squadra d'analisi altamente qualificata, un cuntenutu cumpletu è un eccellente supportu post-vendita.

Specifiche di serviziu

Biblioteca

Strategia di Sequenziamentu

Dati cunsigliati

Amplicone

PacBio Revio

10/30/50 K etichette (CCS)

Requisiti di Campione

Cuncentrazione (ng/µL)

Quantità tutale (µg)

Volume (µL)

≥5

≥0,3

≥20

Cunsegna di Campioni Raccomandata

Congelate i campioni in azotu liquidu per 3-4 ore è cunservateli in azotu liquidu o -80 gradi per una riservazione à longu andà. Hè necessariu u trasportu di i campioni cù ghiaccio seccu.

Flussu di travagliu di serviziu

consegna di campioni

Cunsegna di campioni

Preparazione di a Biblioteca

Custruzzione di a biblioteca

Sequenziamentu

Sequenziamentu

Analisi di dati

Analisi di dati

Servizii dopu a vendita

Servizii dopu a vendita


  • Precedente:
  • Dopu:

  • 流程图第三版2-02

    Include l'analisi seguente:

    ● Cuntrollu di a qualità di i dati grezzi

    ●Clustering OTU/De-noise (ASV)

    ●Annutazione OTU

    ●Analisi di a diversità alfa: parechji indici, cumpresi Shannon, Simpson è ACE.

    ●Analisi di a diversità beta

    ●Analisi intergruppu

    ●Analisi di currelazione: trà i fattori ambientali è a cumpusizione è a diversità di l'OUT

    ●Previsione di u genu funziunale 16S

     

    Istogramma di a distribuzione tassonomica

    图片57

    Arburu filogeneticu di distribuzione di a cumunità

    图片58

    Analisi di a diversità alfa: ACE

    indice图片59

     

    Analisi di a diversità beta: PCoA

    图片60

     

    Analisi intergruppi: ANOVA

    图片61

     

     

     

    Esplora i progressi facilitati da i servizii di sequenziamentu di ampliconi di BMKGene cù PacBio attraversu una cullezzione curata di publicazioni.

    Gao, X. è Wang, H. (2023) 'Analisi comparativa di i profili è di e funzioni batteriche di u rumine durante l'adattazione à diverse fenologie (rigenerazione vs. erbosa) in e pecure merino alpine cù duie fasi di crescita in un prato alpino', Fermentation, 9(1), p. 16. doi: 10.3390/FERMENTATION9010016/S1.

    Li, S. et al. (2023) 'Cattura di a materia scura microbiana in i terreni desertichi utilizendu a metagenomica basata nantu à a culturomica è l'analisi à alta risoluzione', npj Biofilms and Microbiomes 2023 9:1, 9(1), pp. 1–14. doi: 10.1038/s41522-023-00439-8.

    Mu, L. et al. (2022) 'Effetti di i sali di l'acidi grassi nantu à e caratteristiche di fermentazione, a diversità batterica è a stabilità aerobica di l'insilatu mistu preparatu cù erba medica, paglia di risu è crusca di granu', Journal of the Science of Food and Agriculture, 102(4), pp. 1475–1487. doi: 10.1002/JSFA.11482.

    Yang, J. et al. (2023) 'L'interazione trà i biomarcatori di stress ossidativu è a microbiota intestinale in l'effetti antioxidanti di estratti di Sonchus brachyotus DC. in u stress ossidativu intestinale induttu da oxazolone in pesci zebra adulti', Antioxidants 2023, Vol. 12, Pagina 192, 12(1), p. 192. doi: 10.3390/ANTIOX12010192.

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