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Secuenciación de amplicones 16S/18S/ITS (NGS)

La secuenciación de amplicones con tecnología Illumina, dirigida específicamente a los marcadores genéticos 16S, 18S e ITS, es un método eficaz para desentrañar la filogenia, la taxonomía y la abundancia de especies dentro de las comunidades microbianas. Este enfoque implica la secuenciación de las regiones hipervariables de los marcadores genéticos constitutivos. Originalmente introducida como huella molecular porWoeses y otrosEn 1977, esta técnica revolucionó la caracterización del microbioma al permitir análisis sin aislamiento. Mediante la secuenciación de 16S (bacterias), 18S (hongos) y el espaciador transcrito interno (ITS, hongos), los investigadores pueden identificar no solo especies abundantes, sino también especies raras y no identificadas. Ampliamente adoptada como una herramienta fundamental, la secuenciación de amplicones se ha vuelto fundamental para discernir composiciones microbianas diferenciales en diversos entornos, como la boca humana, los intestinos, las heces y otros.


Detalles del servicio

Bioinformática

Resultados de la demostración

Publicaciones destacadas

Características del servicio

● Plataforma de secuenciación: Illumina NovaSeq.

● Amplificación de regiones cortas de 16S, 18S e ITS, entre otros objetivos de amplificación.

● Opciones flexibles de amplicón.

● Experiencia previa en proyectos con múltiples objetivos de amplificación.

Ventajas del servicio

Libre de aislamiento:Identificación rápida de la composición microbiana en muestras ambientales.

Resolución alta:En componentes poco abundantes en muestras ambientales.

Ampliamente aplicable:Estudios de comunidades microbianas diversas.

Análisis bioinformático integral:El último paquete QIIME2 (conocimiento cuantitativo de la ecología microbiana) con diversos análisis en términos de base de datos, anotación, OTU/ASV.

Amplia experienciaCon 150 mil proyectos de secuenciación de amplicones realizados anualmente, BMKGENE aporta más de una década de experiencia, un equipo de análisis altamente calificado, contenido integral y un excelente soporte posventa.

Especificaciones del servicio

Biblioteca

Estrategia de secuenciación

Datos recomendados

Amplicón

Illumina PE250

Etiquetas 50/100/300K (pares de lectura)

Requisitos del servicio

Concentración (ng/µL)

Cantidad total (ng)

Volumen (µL)

≥1

≥200

≥20

● Suelo/lodo: 1-2 g
● Contenido intestinal-animal: 0,5-2 g
● Contenido intestinal-insecto: 0,1-0,25 g
● Superficie de la planta (sedimento enriquecido): 0,1-0,5 g
● Sedimento enriquecido con caldo de fermentación): 0,1-0,5 g
● Heces (animales grandes): 0,5-2 g
● Heces (ratón): 3-5 granos
● Líquido de lavado alveolar pulmonar: papel de filtro
● Hisopado vaginal: 5-6 hisopos
● Hisopado de piel/genitales/saliva/tejido blando oral/hisopado faríngeo/hisopado rectal: 2-3 hisopos
● Microorganismos de superficie: papel de filtro
● Cuerpo de agua/aire/biopelícula: papel de filtro
● Endófitos: 1-2 g
● Placa dental: 0,5-1 g

Flujo de trabajo del servicio

entrega de muestra

Entrega de muestra

Preparación de la biblioteca

Construcción de biblioteca

Secuenciación

Secuenciación

Análisis de datos

Análisis de datos

Servicios posventa

Servicios posventa


  • Anterior:
  • Próximo:

  • 流程图第三版2-01

    Incluye el siguiente análisis:

    • Control de calidad de datos sin procesar
    • Agrupamiento de OTU/De-ruido (ASV)
    • Anotación OTU
    • Análisis de diversidad alfa: múltiples índices, incluidos Shannon, Simpson y ACE.
    • Análisis de diversidad beta
    • Análisis intergrupal
    • Análisis de correlación: entre factores ambientales y composición y diversidad del OUT
    • Predicción del gen funcional 16S

    Histograma de distribución taxonómica

     

    3

     

    mapa de calor de agrupamiento de abundancia taxonómica

    4

     

    Análisis de diversidad alfa: curva de rarefacción

    5

     

    Análisis de diversidad beta: NMDS

    6

     

    Análisis intergrupal: descubrimiento de biomarcadores LEFSE

    7

     

     

     

    Explore los avances facilitados por los servicios de secuenciación de amplicones de BMKGene con Illumina a través de una colección seleccionada de publicaciones.

    Dong, C. et al. (2022) 'Ensamblaje, microbiota central y función de la microbiota del suelo y la corteza de la rizosfera en Eucommia ulmoides', Frontiers in Microbiology, 13. doi: 10.3389/FMICB.2022.855317/FULL.

    Li, Y. et al. (2023) 'Trasplante de consorcios bacterianos sintéticos para el tratamiento de la vaginosis bacteriana inducida por Gardnerella vaginalis en ratones', Microbiome, 11(1), págs. 1–14. doi: 10.1186/s40168-023-01497-y

    Yang, J., Fu, Y. y Liu, H. (2022) 'Microbiomas de polvo de aire recolectado durante el experimento de soporte vital biorregenerativo cerrado terrestre “Lunar Palace 365”', Environmental Microbiomes, 17(1), págs. 1–20. doi: 10.1186/S40793-022-00399-0/FIGURES/8.

    Yin, S. et al. (2022) 'La abundancia dependiente de la materia prima de genes funcionales relacionados con la transformación del nitrógeno controló la pérdida de nitrógeno en el compostaje', Bioresource Technology, 361, pág. 127678. doi: 10.1016/J.BIORTECH.2022.127678.

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