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Secuenciación del genoma de novo de plantas/animales

De NovoLa secuenciación se refiere a la construcción del genoma completo de una especie utilizando tecnologías de secuenciación, por ejemplo, PacBio, Nanopore, NGS, etc., en ausencia de un genoma de referencia.La notable mejora en la longitud de lectura de las tecnologías de secuenciación de tercera generación ha brindado nuevas oportunidades en el ensamblaje de genomas complejos, como aquellos con alta heterocigosidad, alta proporción de regiones repetitivas, poliploides, etc. Con una longitud de lectura de decenas de kilobases, estas lecturas de secuenciación permiten resolución de elementos repetitivos, regiones con contenidos anormales de GC y otras regiones altamente complejas.

Plataforma: PacBio Sequel II /Nanopore PromethION P48/Plataforma Illumina NovaSeq


Detalles del servicio

Resultados de la demostración

Caso de estudio

Ventajas del servicio

1Desarrollo-de-secuenciación-y-bioinformática-ensamblaje-de-novo-del-genoma

Desarrollo de plataformas de secuenciación y bioinformática ende novoensamblaje del genoma

(Amarasinghe SL et al.,Biología del genoma, 2020)

● Construir genomas novedosos y mejorar los genomas de referencia existentes para especies de interés.

● Mayor precisión, continuidad e integridad en el montaje.

● Construcción de recursos fundamentales para la investigación en polimorfismo de secuencia, QTL, edición de genes, mejoramiento, etc.

● Equipado con un espectro completo de plataformas de secuenciación de tercera generación: solución integral de ensamblaje del genoma

● Estrategias flexibles de secuenciación y ensamblaje que satisfacen diversos genomas con diferentes características

● Equipo bioinformático altamente cualificado y con gran experiencia en ensamblajes de genomas complejos, incluyendo poliploides, genomas gigantes, etc.

● Más de 100 casos exitosos con un factor de impacto publicado acumulativo de más de 900

● El tiempo de respuesta es tan rápido como 3 meses para el ensamblaje del genoma a nivel de cromosoma.

● Sólido soporte técnico con una serie de patentes y derechos de autor de software tanto en la vertiente experimental como en bioinformática.

Especificaciones de servicio

 

Contenido

 

 

Plataforma

 

 

Longitud de lectura

 

 

Cobertura

 

Encuesta del genoma

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

≥50X

 

 

Secuenciación del genoma

 

PacBio Revio

 

Lecturas de alta fidelidad de 15 kb

 

≥30X

 

Hola-C

 

Illumina NovaSeq

 

PE150

 

100X

 

 

 

flujo de trabajo

de novo

Requisitos de muestra y entrega

Requisitos de muestra:

Especies

Tejido

Para PacBio

Para nanoporos

animales

Órganos viscerales (hígado, bazo, etc.)

≥ 1,0 gramos

≥ 3,5 gramos

Músculo

≥ 1,5 gramos

≥ 5,0 gramos

Sangre de mamíferos

≥ 1,5 ml

≥ 5,0 ml

Sangre de peces o pájaros.

≥ 0,2 ml

≥ 0,5 ml

Plantas

hojas frescas

≥ 1,5 gramos

≥ 5,0 gramos

Pétalo o tallo

≥ 3,5 gramos

≥ 10,0 gramos

Raíces o semillas

≥ 7,0 gramos

≥ 20,0 gramos

Células

Cultivo de células

≥3×107

≥1×108

Entrega de muestra recomendada

Envase: tubo de centrífuga de 2 ml (no se recomienda papel de aluminio)
Para la mayoría de las muestras, recomendamos no conservarlas en etanol.
Etiquetado de muestras: las muestras deben estar claramente etiquetadas y ser idénticas al formulario de información de muestra enviado.
Envío: Hielo seco: las muestras deben empaquetarse primero en bolsas y enterrarse en hielo seco.

Flujo de trabajo del servicio

Control de calidad de muestra

Diseño de experimentos

entrega de muestra

Entrega de muestra

experimento piloto

Extracción de ADN

Preparación de la biblioteca

construcción de biblioteca

Secuenciación

Secuenciación

Análisis de los datos

Análisis de los datos

Servicios postventa

Servicios postventa


  • Anterior:
  • Próximo:

  • *Los resultados de demostración que se muestran aquí provienen todos de genomas publicados con Biomarker Technologies

    1.Circos sobre el ensamblaje del genoma a nivel cromosómico deG. rotundifoliumpor plataforma de secuenciación Nanopore

    3Circos-sobre-características-genómicas-del-genoma-del-algodón

    Wang M et al.,Biología molecular y evolución, 2021 

    2.Estadísticas del ensamblaje y anotación del genoma del centeno Weining

    4Estadísticas-de-ensamblaje-y-anotación-del-genoma

    Li G et al.,Genética de la naturaleza, 2021

    3.Predicción genética deSechium edulegenoma, derivado de tres métodos de predicción:De novopredicción, predicción basada en homología y predicción basada en datos de RNA-Seq

    5Predicción genética

    Fu A y otros,Investigación en horticultura, 2021

    4.Identificación de repeticiones terminales largas intactas en tres genomas de algodón.

    6Identificación-de-elementos-repetitivos-del-genoma

    Wang M et al.,Biología molecular y evolución, 2021

    5.Mapa de calor Hi-C delC. acuminatagenoma que muestra interacciones generales en todo el genoma.La intensidad de las interacciones Hi-C es proporcional a la distancia lineal entre contigs.Una línea recta limpia en este mapa de calor indica un anclaje muy preciso de los cóntigos en los cromosomas.(Relación de anclaje Contig: 96,03%)

    7Mapa de calor Hi-C en anclaje de secuenciación ensamblado

    Kang M et al.,comunicaciones de la naturaleza,2021

     

    Caso BMK

    Un ensamblaje genómico de alta calidad destaca las características genómicas del centeno y los genes agronómicamente importantes

    Publicado: Genética de la naturaleza, 2021

    Estrategia de secuenciación:

    Ensamblaje del genoma: modo PacBio CLR con biblioteca de 20 kb (497 Gb, aprox. 63×)
    Corrección de secuencia: NGS con biblioteca de ADN de 270 pb (430 Gb, aprox. 54×) en plataforma Illumina
    Anclaje de Contigs: biblioteca Hi-C (560 Gb, aprox. 71×) en plataforma Illumina
    Mapa óptico: (779,55 Gb, aprox. 99×) en Bionano Irys

    Resultados clave

    1. Se publicó un ensamblaje del genoma del centeno Weining con un tamaño total del genoma de 7,74 Gb (98,74% del tamaño del genoma estimado mediante citometría de flujo).El andamio N50 de este conjunto alcanzó 1,04 Gb.El 93,67% de los cóntigos se anclaron con éxito en 7 pseudocromosomas.Esta asamblea fue evaluada por mapa de vinculación, LAI y BUSCO, lo que resultó en puntajes altos en todas las evaluaciones.

    2. Se realizaron más estudios sobre genómica comparada, mapa de ligamiento genético y estudios de transcriptómica sobre la base de este genoma.Se revelaron una serie de rasgos genómicos relacionados, incluidas las duplicaciones de genes en todo el genoma y su impacto en los genes de biosíntesis de almidón;organización física de loci complejos de prolamina, características de expresión genética subyacentes al rasgo de encabezado temprano y regiones cromosómicas y loci putativos asociados a la domesticación en el centeno.

    PB-estudio-de-caso-de-secuenciación-de-ARN-completo-de-longitud-completa

    Diagrama circos sobre las características genómicas del genoma del centeno Weining

    PB-empalme-alternativo-de-ARN-de-longitud-completa

    Análisis evolutivos y de sintenia cromosómica del genoma del centeno.

    Referencia

    Li, G., Wang, L., Yang, J.et al.Un ensamblaje genómico de alta calidad resalta las características genómicas del centeno y los genes agronómicamente importantes.Nat Genet 53,574–584 (2021).

    https://doi.org/10.1038/s41588-021-00808-z

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