● Úsase ARN total exosomal como material de entrada. Durante a purificación, empréganse esferas de miRNA para illar o miRNA.
● Análise bioinformática centrada na predición de miARN e os seus obxectivos.
● Análise bioinformática exhaustiva: permite a identificación de miARN coñecidos e novos, a identificación de miARN diana e a correspondente anotación funcional e enriquecemento con múltiples bases de datos (KEGG, GO).
● Control de calidade rigoroso: Implementamos puntos de control básicos en todas as etapas, desde a preparación de mostras e bibliotecas ata a secuenciación e a bioinformática. Esta monitorización meticulosa garante a entrega de resultados de alta calidade consistente.
● Asistencia posvenda: O noso compromiso vai máis alá da finalización do proxecto cun período de servizo posvenda de 3 meses. Durante este tempo, ofrecemos seguimento do proxecto, asistencia para a resolución de problemas e sesións de preguntas e respostas para abordar calquera dúbida relacionada cos resultados.
| Biblioteca | Plataforma | Datos recomendados | Control de calidade de datos |
| Illamento de miRNA exosomal | Illumina SE50 | 10M-20M lecturas | Q30≥85% |
Nucleótidos:
| Cantidade (ng) | Volume (μL) |
| 40 | 20 |
Tecido:
Exosoma: 100 μL; 40 μg; >10^9 partículas/mL
Soro/plasma: 5 mL
Sobrenadante de cultivo celular: 100 mL
Urina: 100 mL
Saliva: 15 mL
Secreción nasal: 15 mL
Líquido cefalorraquídeo: 15 mL
Líquido amniótico: 50 mL
Semen: 5 mL
Bile: 5 mL
Ascite: 50 mL
Leite: 15 ml
Fluído folicular: 15 mL
Sobrenadante fecal: 50 mL
Sobrenadante de cultivo microbiano: 100 mL
Tecido animal: 3 g
Tecido vexetal: 1 g
Recipiente: tubo de centrífuga de 2 mL (non se recomenda o uso de papel de aluminio)
Etiquetado de mostra: Agrupar+replicar, por exemplo, A1, A2, A3; B1, B2, B3.
Envío:
1. Xeo seco: as mostras deben embalarse en bolsas e soterrarse en xeo seco.
2. Tubos ARN estables: as mostras de ARN pódense secar en tubos de estabilización de ARN (por exemplo, RNAstable®) e enviar a temperatura ambiente.
Bioinformática
● Control de calidade dos datos brutos
● Clasificación do ARNp
● Aliñamento cun xenoma de referencia
● Identificación de microARN coñecidos e novos
● Análise de expresión diferencial de miARN
● Anotación funcional de miARN dianas
Identificación de microARN: estrutura e profundidade
Expresión diferencial de miRNA: agrupamento xerárquico
Anotación funcional da diana dos miRNAs expresados diferencialmente