ọkọlọtọ-03

Ngwaahịa

Usoro nhazi ogologo nke na-abụghị koodu-Illumina

RNA ndị dị ogologo na-abụghị koodu (lncRNAs) dị ogologo karịa nucleotides 200 nke nwere obere ikike koodu ma bụrụ ihe dị mkpa n'ime RNA na-abụghị koodu. A na-ahụ RNA ndị a na nucleus na cytoplasm, ha na-arụ ọrụ dị mkpa na nhazi epigenetic, transcriptional, na post-transcriptional, na-emesi ike mkpa ha dị n'ịkpụzi usoro cellular na molekul. Usoro LncRNA bụ ngwa dị ike na nhazi sel, Ontogenesis, na ọrịa mmadụ.

Ikpo okwu: Illumina NovaSeq X


Nkọwa Ọrụ

Bioinformatics

Nsonaazụ ngosi

Mbipụta Ndị A Mapụtara

Uru Ọrụ

Nyocha nkwonkwo nke mRNA na lncRNA: site na ijikọta ọnụọgụ nke mRNA transcripts na ọmụmụ nke lncRNA na ihe mgbaru ọsọ ha, ọ ga-ekwe omume ịnweta nkọwa zuru ezu nke usoro nchịkwa dị n'okpuru nzaghachi sel.

Ọkachamara sara mbaraAnyị ahaziela ihe karịrị ihe nlele 230,000, gụnyere ihe nlele dị iche iche na ebumnuche ọrụ. Anyị na-eweta ọtụtụ ahụmịhe na ọrụ ọ bụla.

Nyocha nkwonkwo nke mRNA na lncRNA: Anyị na-ejikọta ọnụọgụ nke mRNA transcripts na ọmụmụ nke lncRNA na ihe mgbaru ọsọ ha, na-eme ka o kwe omume ịnweta nkọwa zuru ezu nke usoro nchịkwa dị n'okpuru nzaghachi sel.

Njikwa Ogo Siri Ike: Anyị na-etinye isi ihe njikwa n'ọrụ n'ọkwa niile, site na nkwadebe ihe nlele ruo na nkwadebe ọbá akwụkwọ, usoro na bioinformatics. Nlekota anyị nke ọma na-eme ka a hụ na a na-enye nsonaazụ dị elu mgbe niile.

Nkọwa zuru oke: Anyị na-eji ọtụtụ ebe nchekwa data iji kọwaa mkpụrụ ndụ ihe nketa dị iche iche (DEGs) nke ọma ma mee nyocha mmụba kwekọrọ. Usoro a zuru oke na-enye nghọta n'ime usoro mkpụrụ ndụ na molekul dị n'okpuru nzaghachi transcriptome, na-eme ka ị nweta ozi niile enwere ike gbasara data nnwale gị.

Nkwado Mgbe Ahịa Gasịrị: Anyị ghọtara mkpa ịnọ ebe a dị, ọ bụ ya mere nkwa anyị ji agafe n'imecha ọrụ ahụ site na oge ọrụ ọnwa atọ mgbe erechara ya. N'oge a, anyị na-enye nyocha ọrụ, enyemaka nsogbu, na nnọkọ ajụjụ na azịza iji zaa ajụjụ ọ bụla metụtara nsonaazụ ya.

Ihe Nlereanya na Nnyefe

Ọbá akwụkwọ

Ikpo okwu

Data akwadoro

QC data

ọbá akwụkwọ ntụziaka rRNA agwụla

Illumina PE150

10-16 Gb

Q30≥85%

Nuklịọdị:

Njikọta (ng/μl)

Ọnụọgụ (μg)

Ịdị ọcha

Iguzosi Ike n'Ezi Ihe

≥ 80

≥ 0.8

OD260/280=1.7-2.5

OD260/230=0.5-2.5

Enwere ike ịhụ mmebi protein ma ọ bụ DNA na jel n'enweghị oke ma ọ bụ enweghị ya.

RIN≥6.0;

5.0≥28S/18S≥1.0;

oke ma ọ bụ enweghị elu ntọala

● Osisi:

Mgbọrọgwụ, Osisi ma ọ bụ Akwụkwọ: 450 mg

Akwụkwọ ma ọ bụ Mkpụrụ: 300 mg

Mkpụrụ osisi: 1.2 g

● Anụmanụ:

Obi ma ọ bụ eriri afọ: 450 mg

Viscera ma ọ bụ ụbụrụ: 240 mg

Akwara: 600 mg

Ọkpụkpụ, Ntutu ma ọ bụ Akpụkpọ Ahụ: 1.5g

● Arthropods:

Ụmụ ahụhụ: 9g

Crustacea: 450 mg

● Ọbara zuru oke:Tube abụọ

● Mkpụrụ ndụ: 106 mkpụrụ ndụ

● Ọbara na Plasma: 6 mL

Nnyefe Ihe Nlereanya Akwadoro

Akpa: 2 ml centrifuge tube (A naghị atụ aro ka e jiri tin foil mee ya)

Ihe atụ nke akara: Otu+mkpụrụ dịka ọmụmaatụ A1, A2, A3; B1, B2, B3.

Mbupu:

1. Aịsị kpọrọ nkụ: A ga-etinye ihe nlele n'ime akpa ma lie ha n'ime ice kpọrọ nkụ.

2. Tubọọlụ RNA ndị a na-anaghị agbanwe agbanwe: A pụrụ ịkpọ nkụ ihe nlele RNA na tube RNA nke na-eme ka RNA sie ike (dịka ọmụmaatụ RNAstable®) ma ziga ya n'ime okpomọkụ ụlọ.

Usoro Ọrụ Ọrụ

Ihe nlele QC

Nhazi nnwale

nnyefe ihe nlele

Nnyefe ihe nlele

Nnwale nnwale

Mwepụta RNA

Nkwadebe Ọbá Akwụkwọ

Iwu ụlọ akwụkwọ

Usoro nhazi

Usoro nhazi

Nyocha data

Nyocha data

Ọrụ Mgbe Ahịa Gasịrị

Ọrụ mgbe erechara


  • Nke gara aga:
  • Osote:

  • Bioinformatics

    wps_doc_12

     

    • Data ndị a na-anaghị emepụta
    • QC data
    • Nhazi nke mkpụrụ ndụ ihe nketa
    • Nhazi mkpụrụ ndụ ihe nketa (Njikọ ọzọ, nhazi usoro mkpụrụ ndụ ihe nketa na amụma mkpụrụ ndụ ihe nketa ọhụrụ)
    • Nhazi ngosipụta mkpụrụ ndụ ihe nketa
    • Nyocha ngosipụta dị iche iche
    • Nkọwa na mmụba DEG + Mkpụrụ ndụ ihe nketa ebumnuche lncRNA dị iche iche
    • Nchọpụta edemede
    • Nchọpụta LncRNA (nchekwa LncRNA na LncRNA a ma ama)
    • Amụma mkpụrụ ndụ ihe nketa nke lncRNA
    • Nhazi ngosipụta lncRNA
    • Nyocha nkwonkwo na data mRNA

    Nyocha nke Nkọwapụta Mkpụrụ Ndụ Ihe Dị Iche (DEGs)

     

     图片30

     

     

    Ngụkọta nke okwu lncRNA - nchịkọta

     

    图片31 

     

    Ịbawanye mkpụrụ ndụ ihe nketa nke lncRNA

     

     图片32

     

    Nyocha ọnọdụ mRNA na lncRNA - atụmatụ Circos (gburugburu etiti bụ mRNA na cicrlce dị n'ime bụ lncRNA)

     

     图片33

    Chọpụta ọganihu ndị ọrụ nhazi nke BMKGene's lncRNA na-eme site na nchịkọta akwụkwọ e depụtara.

     

    Ji, H. et al. (2020) 'Nchọpụta, amụma ọrụ, na nkwenye dị mkpa nke lncRNAs metụtara nrụgide oyi na imeju oke',Akụkọ Sayensị2020 10:1, 10(1), pp. 1–14. doi: 10.1038/s41598-020-57451-7.

    Jia, Z. na ndị otu ya (2021) 'Nyocha nke Transcriptomic Integrated na-ekpughe usoro mgbochi ahụ ike maka nje a na-ahụkarị nke CyHV-3',Ókèala na Immunology, 12, p. 687151. doi: 10.3389/FIMMU.2021.687151/BIBTEX.

    Wang, XJ na ndị otu ya (2022) 'Mkpakọ nke Multi-Omics nke Netwọk Nchịkwa RNA Endogenous na-asọmpi na Kansa Nkuume Obere Cell: Àgwà Molekụla na Ndị Na-achọ Ọgwụ',Ókèala na Oncology, 12, p. 904865. doi: 10.3389/FONC.2022.904865/BIBTEX.

    Xiao, L. na ndị otu ya (2020) 'Mgbasa mkpụrụ ndụ ihe nketa nke netwọk njikọ mkpụrụ ndụ ihe nketa dị n'okpuru fotosintesis na Populus',Akwụkwọ akụkọ ihe gbasara osisi, 18(4), pp. 1015–1026. doi: 10.1111/PBI.13270.

    Zheng, H. na ndị otu ya (2022) 'Netwọk Nhazi Ụwa Maka Ngosipụta Mkpụrụ Ndụ Na-adịghị Mma na Mgbaàmà Metabolic Na-adịghị Mma na Mkpụrụ Ndụ Ahụ Na-alụso Ọrịa Graves na Ọrịa Thyroid Hashimoto',Ókèala na Immunology, 13, p. 879824. doi: 10.3389/FIMMU.2022.879824/BIBTEX.

    nweta ọnụahịa

    Dee ozi gị ebe a zitere anyị ya

    Zitere anyị ozi gị: