条形banner-03

Berhem

Rêzkirina mRNA ya tevahî-dirêj -PacBio

Her çiqas rêzkirina mRNA ya li ser bingeha NGS amûrek piralî ye ji bo hejmartina îfadeya genan, lê girêdayîbûna wê bi xwendinên kurt karanîna wê di analîzên transkrîptomîk ên tevlihev de sînordar dike. Ji aliyekî din ve, rêzkirina PacBio (Iso-Seq) teknolojiya xwendina dirêj bikar tîne, ku rêzkirina transkrîptên mRNA yên tevahî-dirêj gengaz dike. Ev rêbaz lêkolînek berfireh a splicing alternatîf, fusionên genan, û poly-adenylation hêsan dike. Lêbelê, ji ber mîqdara zêde ya daneyên pêwîst, vebijarkên din ji bo hejmartina îfadeya genan hene. Teknolojiya rêzkirina PacBio xwe dispêre rêzkirina yek-molekulî, rast-dem (SMRT), ku di girtina transkrîptên mRNA yên tevahî-dirêj de avantajek berbiçav peyda dike. Ev rêbaza nûjen karanîna rêberên pêlên moda sifir (ZMW) û bîrên mîkrofabrîkkirî vedihewîne ku çavdêriya rast-dem a çalakiya DNA polîmerazê di dema rêzkirina de gengaz dike. Di nav van ZMW-yan de, DNA polîmeraza PacBio zincîrek DNA ya temamker sentez dike, xwendinên dirêj çêdike ku tevahiya transkrîptên mRNA digire nav xwe. Xebata PacBio di moda rêzkirina Circular Consensus (CCS) de bi rêzkirina dubarekirî ya heman molekulê rastbûnê zêde dike. Xwendinên HiFi yên çêkirî xwedî rastbûnek berawirdî bi NGS re ne, ku bêtir beşdarî analîzek berfireh û pêbawer a taybetmendiyên tevlihev ên transkrîptomîk dibin.

Platform: PacBio Sequel II; PacBio Revio


  • :
  • Agahiyên Xizmetê

    Bîyoenformatîk

    Encamên Demo

    Weşanên Taybet

    Taybetmendî

    ● Senteza cDNA ji mRNAya polî-A û piştre amadekirina pirtûkxaneyê

    ● Rêzkirin di moda CCS de, çêkirina xwendinên HiFi

    ● Rêzkirina transkrîptên dirêj

    ● Analîz pêwîstî bi genomek referansê nake; lêbelê, ew dikare were bikar anîn

    ● Analîza biyoenformatîkî analîzkirina transkriptên îzoform lncRNA, hevgirtina genan, polî-adenîlasyon û avahiya genan gengaz dike.

    Avantajên Xizmetê

    2

    Rastbûna Bilind: Xwendina HiFi bi rastbûnek >99.9% (Q30), berawirdî NGS

    ● Analîza Splasinga Alternatîf: rêzkirina hemû transkrîptan naskirin û taybetmendiya îzoforman gengaz dike

    Pisporiya BerfirehTîma me, digel tomarên serkeftinê di temamkirina zêdetirî 1100 projeyên transkrîptomê yên PacBio yên dirêj û pêvajoykirina zêdetirî 2300 nimûneyan de, gelek ezmûnê tîne her projeyekê.

    Piştgiriya Piştî FirotanêPabendbûna me ji temamkirina projeyê û pê ve jî bi heyameke xizmeta piştî firotanê ya 3 mehan berdewam dike. Di vê demê de, em şopandina projeyê, alîkariya çareserkirina pirsgirêkan, û rûniştinên Pirs û Bersîvê pêşkêş dikin da ku pirsên têkildarî encaman çareser bikin.

    Pêdiviyên Nimûneyan û Radestkirin

    Pirtûkxane

    Stratejiya rêzkirinê

    Daneyên pêşniyarkirî

    Kontrola Kalîteyê

    Pirtûkxaneya CCS ya mRNA ya dewlemendkirî bi PolyA

    PacBio Berdewamiya II

    PacBio Revio

    20/40 Gb

    5/10 M CCS

    Q30≥85%

    Pêdiviyên Nimûneyê:

    Nukleotîd:

    ● Nebat:

    Kok, Qûn an Petal: 450 mg

    Pel an Toxm: 300 mg

    Fêkî: 1.2 g

    ● Heywan:

    Dil an Rûvî: 300 mg

    Mejî an jî organên zikê: 240 mg

    Masûlke: 450 mg

    Hestiyên, Por an Çerm: 1g

    ● Artropod:

    Mêşhingiv: 6g

    Krustacea: 300 mg

    ● Xwîna tevahî: 1 lûle

    ● Xane: 106 şaneyan

     

    Têkelkirin (ng/μl)

    Mîqdar (μg)

    Paqijî

    Linavketinî

    ≥ 100

    ≥ 1.0

    OD260/280=1.7-2.5

    OD260/230=0.5-2.5

    Gemarîbûna proteîn an DNAyê li ser jelê bi sînor an jî tune ye.

    Ji bo nebatan: RIN≥7.5;

    Ji bo heywanan: RIN≥8.0;

    5.0≥ 28S/18S≥1.0;

    bilindahiya bingehîn sînorkirî an tune

    Radestkirina Nimûneya Pêşniyarkirî

    Têrr: Lûleya santrifûjê ya 2 ml (Foliya qalayî nayê pêşniyarkirin)

    Nimûneya nîşankirinê: Komkirin+dubarekirin mînak A1, A2, A3; B1, B2, B3.

    Şandin:

    1. Qeşaya hişk: Pêdivî ye ku nimûne di nav kîsan de werin pak kirin û di nav qeşaya hişk de werin veşartin.

    2. Lûleyên RNA-yê yên stabîl: Nimûneyên RNA-yê dikarin di lûleya stabîlkirina RNA-yê de (mînak RNAstable®) werin hişk kirin û di germahiya odeyê de werin şandin.

    Herikîna Karê Xizmetê

    Nimûneya QC

    Sêwirana ceribandinê

    radestkirina nimûneyan

    Radestkirina nimûneyê

    Ceribandina pîlot

    Derxistina RNAyê

    Amadekariya Pirtûkxaneyê

    Avakirina pirtûkxaneyê

    Rêzkirin

    Rêzkirin

    Analîza daneyan

    Analîza daneyan

    Xizmetên piştî firotanê

    Xizmetên piştî firotanê


  • Pêşî:
  • Piştî:

  • —-PacBio-Tenê-01

    Analîza jêrîn vedihewîne:

    ● Kontrolkirina kalîteya daneyên xav

    ● Analîza Polyadenîlasyonê ya Alternatîf (APA)

    ● Analîza transkrîptê ya fusion

    ● Analîza Splasinga Alternatîf

    ● Analîza Ortologên Yek-Kopiya Gerdûnî ya Benchmarking (BUSCO)

    ● Analîza transkrîptên nû: pêşbîniya rêzikên kodkirinê (CDS) û şîrovekirina fonksiyonel

    ● Analîza lncRNA: pêşbîniya lncRNA û hedefan

    ● Nasnameya MîkroSatelîtê (SSR)

    Analîza BUSCO

     

     图片26

     

    Analîza Splicing a Alternatîf

    图片27

    Analîza Polyadenîlasyonê ya Alternatîf (APA)

     

     图片28

     

    Têbînîkirina fonksiyonel a transkrîptên nû

    图片29 

    Di vê weşana taybetî de pêşketinên ku ji hêla karûbarên rêzkirina mRNA ya tevahî ya Nanopore ya BMKGene ve têne hêsankirin vekolin.

     

    Ma, Y. û yên din (2023) 'Analîza berawirdî ya rêbazên rêzkirina RNA ya PacBio û ONT ji bo destnîşankirina jehra Nemopilema Nomurai', Genomics, 115(6), r. 110709. doi: 10.1016/J.YGENO.2023.110709.

    Chao, Q. û yên din (2019) 'Dînamîkên pêşketinê yên transkrîptoma stûna Populus', Kovara Biyoteknolojiya Nebatan, 17(1), r. 206–219. doi: 10.1111/PBI.12958.

    Deng, H. û yên din. (2022) 'Guhertinên Dînamîk di Naveroka Asîda Askorbîk de di Dema Pêşveçûn û Gihiştina Fêkiyan a Actinidia latifolia (Berhemeke Fêkiyan a Dewlemend bi Askorbatê) û Mekanîzmayên Molekulî yên Girêdayî de', Kovara Navneteweyî ya Zanistên Molekulî, 23(10), r. 5808. doi: 10.3390/IJMS23105808/S1.

    Hua, X. û yên din. (2022) 'Pêşbînîkirina bi bandor a genên rêya biyosentezê yên ku di polîfîlînên biyoaktîv ên di polîfîla Parîsê de cih digirin', Communications Biology 2022 5:1, 5(1), pp. 1–10. doi: 10.1038/s42003-022-03000-z.

    Liu, M. û yên din (2023) 'Analîza Têkel a PacBio Iso-Seq û Illumina RNA-Seq a Genên Tuta absoluta (Meyrick) Transcriptome û Sîtokrom P450', Insects, 14(4), r. 363. doi: 10.3390/INSECTS14040363/S1.

    Wang, Lijun û yên din. (2019) 'Lêkolînek li ser tevliheviya transkrîptomê bi karanîna analîza demrast a yek-molekulî ya PacBio bi hev re bi rêzkirina RNA ya Illumina re ji bo têgihîştinek çêtir a bîyosenteza asîda rîcînoleîk di Ricinus communis de', BMC Genomics, 20(1), pp. 1–17. doi: 10.1186/S12864-019-5832-9.

    teklifek bistîne

    Peyama xwe li vir binivîse û ji me re bişîne

    Peyama xwe ji me re bişînin: