条形ປ້າຍໂຄສະນາ-03

ຜະລິດຕະພັນ

10x Genomics Visium Spatial Transcriptome

Spatial transcriptomics ແມ່ນເຕັກໂນໂລຢີທີ່ທັນສະ ໄໝ ທີ່ຊ່ວຍໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສືບສວນຮູບແບບການສະແດງອອກຂອງ gene ພາຍໃນເນື້ອເຍື່ອໃນຂະນະທີ່ຮັກສາສະພາບການທາງກວ້າງຂອງພວກມັນ. ເວທີທີ່ມີປະສິດທິພາບຫນຶ່ງໃນໂດເມນນີ້ແມ່ນ 10x Genomics Visium ບວກໃສ່ກັບລໍາດັບ Illumina. ຫຼັກການຂອງ 10X Visium ແມ່ນຢູ່ໃນຊິບພິເສດທີ່ມີພື້ນທີ່ການຈັບພາບທີ່ກໍານົດໄວ້ບ່ອນທີ່ພາກສ່ວນເນື້ອເຍື່ອຖືກວາງໄວ້. ພື້ນທີ່ການຈັບພາບນີ້ມີຈຸດທີ່ມີບາໂຄດ, ແຕ່ລະຈຸດທີ່ສອດຄ້ອງກັບສະຖານທີ່ທາງກວ້າງຂອງພື້ນທີ່ເປັນເອກະລັກພາຍໃນເນື້ອເຍື່ອ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ໂມເລກຸນ RNA ທີ່ຈັບໄດ້ຈາກເນື້ອເຍື່ອຈະຖືກຕິດສະຫຼາກດ້ວຍຕົວລະບຸໂມເລກຸນທີ່ເປັນເອກະລັກ (UMIs) ໃນລະຫວ່າງຂະບວນການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບກັນ. ຈຸດ barcoded ແລະ UMIs ເຫຼົ່ານີ້ເຮັດໃຫ້ການສ້າງແຜນທີ່ທາງກວ້າງຂອງພື້ນທີ່ຊັດເຈນແລະປະລິມານການສະແດງອອກຂອງ gene ໃນຄວາມລະອຽດຂອງຈຸລັງດຽວ. ການປະສົມປະສານຂອງຕົວຢ່າງ barcoded spatially ແລະ UMIs ຮັບປະກັນຄວາມຖືກຕ້ອງແລະຄວາມສະເພາະຂອງຂໍ້ມູນທີ່ສ້າງຂຶ້ນ. ໂດຍການນໍາໃຊ້ເຕັກໂນໂລຢີ Spatial Transcriptomics ນີ້, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດເຂົ້າໃຈຢ່າງເລິກເຊິ່ງກ່ຽວກັບອົງການຈັດຕັ້ງທາງກວ້າງຂອງຈຸລັງແລະປະຕິສໍາພັນໂມເລກຸນທີ່ສັບສົນທີ່ເກີດຂື້ນພາຍໃນເນື້ອເຍື່ອ, ສະເຫນີຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ບໍ່ມີຄ່າກ່ຽວກັບກົນໄກທີ່ຕິດພັນກັບຂະບວນການທາງຊີວະພາບໃນຫຼາຍຂົງເຂດ, ລວມທັງ oncology, neuroscience, ຊີວະວິທະຍາການພັດທະນາ, immunology. , ແລະການສຶກສາດ້ານພືດສາດ.

ເວທີ: 10X Genomics Visium ແລະ Illumina NovaSeq


ລາຍລະອຽດການບໍລິການ

ຊີວະວິທະຍາ

ຜົນການສາທິດ

ສິ່ງພິມທີ່ໂດດເດັ່ນ

ໂຄງການທາງວິຊາການ

图片2(1)-01

ຄຸນສົມບັດ

● ຄວາມລະອຽດ: 100 µM

● ເສັ້ນຜ່າສູນກາງຈຸດ: 55 µM

● ຈໍານວນຈຸດ: 4992

● ພື້ນທີ່ການຈັບພາບ: 6.5 x 6.5 ມມ

● ແຕ່ລະຈຸດທີ່ມີບາໂຄດຖືກບັນຈຸດ້ວຍ primers ປະກອບດ້ວຍ 4 ພາກສ່ວນ:

- ຫາງ poly(dT) ສໍາລັບ mRNA priming ແລະການສັງເຄາະ cDNA

- ຕົວລະບຸໂມເລກຸນທີ່ເປັນເອກະລັກ (UMI) ເພື່ອແກ້ໄຂອະຄະຕິການຂະຫຍາຍ

- ບາໂຄດທາງກວ້າງ

- ການ​ເຊື່ອມ​ຕໍ່​ລໍາ​ດັບ​ຂອງ​ການ​ອ່ານ​ບາງ​ສ່ວນ 1 primer sequencing​

● H&E staining ຂອງພາກສ່ວນ

ຂໍ້ດີ

ບໍລິການປະຕູດຽວ: ປະສົມປະສານປະສົບການ ແລະຂັ້ນຕອນທີ່ອີງໃສ່ທັກສະທັງໝົດ, ລວມທັງການແຍກ cryo-sectioning, staining, tissue optimization, spatial barcoding, Library, sequencing and bioinformatics .

● ທີມງານວິຊາການທີ່ມີຄວາມຊໍານິຊໍານານສູງ: ມີປະສົບການຫຼາຍກວ່າ 250 ຊະນິດເນື້ອເຍື່ອ ແລະ 100+ ຊະນິດລວມທັງມະນຸດ, ຫນູ, ສັດລ້ຽງລູກດ້ວຍນົມ, ປາ ແລະພືດ.

ອັບເດດເວລາຈິງໃນໂຄງການທັງໝົດ: ມີການຄວບຄຸມອັນເຕັມທີ່ຂອງຄວາມຄືບຫນ້າຂອງການທົດລອງ.

Bioinformatics ມາດຕະຖານທີ່ສົມບູນແບບ:ຊຸດປະກອບມີ 29 ການວິເຄາະແລະ 100+ ຕົວເລກທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ.

ການວິເຄາະຂໍ້ມູນແບບປັບແຕ່ງແລະການເບິ່ງເຫັນ: ມີສໍາລັບການຮ້ອງຂໍການຄົ້ນຄວ້າທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

ການວິເຄາະຮ່ວມທາງເລືອກທີ່ມີການຈັດລໍາດັບ mRNA ເຊນດຽວ

ຂໍ້ມູນຈໍາເພາະ

ຄວາມຕ້ອງການຕົວຢ່າງ

ຫໍສະໝຸດ

ຍຸດທະສາດການຈັດລໍາດັບ

ຂໍ້​ມູນ​ແນະ​ນໍາ​

ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ

OCT-embedded cryo ຕົວຢ່າງ

(ເສັ້ນຜ່າສູນກາງທີ່ດີທີ່ສຸດ: ປະມານ 6x6x6 mm³)

2 ຕັນຕໍ່ຕົວຢ່າງ

10X Visium cDNA ຫ້ອງສະຫມຸດ

Illumina PE150

50K PE ອ່ານຕໍ່ຈຸດ

(60Gb)

RIN > 7

ສໍາ​ລັບ​ລາຍ​ລະ​ອຽດ​ເພີ່ມ​ເຕີມ​ກ່ຽວ​ກັບ​ການ​ແນະ​ນໍາ​ການ​ກະ​ກຽມ​ຕົວ​ຢ່າງ​ແລະ​ຂະ​ບວນ​ການ​ການ​ບໍ​ລິ​ການ​, ກະ​ລຸ​ນາ​ສົນ​ທະ​ນາ​ກັບ a

ຂະບວນການບໍລິການ

ໃນຂັ້ນຕອນການກະກຽມຕົວຢ່າງ, ການທົດລອງການສະກັດເອົາ RNA ຈໍານວນຫລາຍໃນເບື້ອງຕົ້ນແມ່ນດໍາເນີນເພື່ອຮັບປະກັນ RNA ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງສາມາດໄດ້ຮັບ. ໃນຂັ້ນຕອນການເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງເນື້ອເຍື່ອ, ພາກສ່ວນຕ່າງໆໄດ້ຖືກ stained ແລະເບິ່ງເຫັນແລະເງື່ອນໄຂ permeabilization ສໍາລັບການປ່ອຍ mRNA ອອກຈາກເນື້ອເຍື່ອແມ່ນ optimized. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ໂປໂຕຄອນທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ໃນລະຫວ່າງການກໍ່ສ້າງຫ້ອງສະຫມຸດ, ຕິດຕາມດ້ວຍລໍາດັບແລະການວິເຄາະຂໍ້ມູນ.

ຂະບວນການເຮັດວຽກຂອງການບໍລິການທີ່ສົມບູນປະກອບດ້ວຍການອັບເດດແບບສົດໆແລະການຢືນຢັນຂອງລູກຄ້າເພື່ອຮັກສາວົງການຄໍາຄຶດຄໍາເຫັນທີ່ຕອບສະຫນອງ, ຮັບປະກັນການປະຕິບັດໂຄງການທີ່ລຽບງ່າຍ.

图片4

  • ທີ່ຜ່ານມາ:
  • ຕໍ່ໄປ:

  • 流程图1.15-02

     

    ລວມມີການວິເຄາະຕໍ່ໄປນີ້:

     ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂໍ້ມູນ:

    o ຜົນຜະລິດຂໍ້ມູນແລະການແຈກຢາຍຄະແນນທີ່ມີຄຸນນະພາບ

    o ການກວດຫາພັນທຸກໍາຕໍ່ຈຸດ

    o ການປົກຫຸ້ມຂອງເນື້ອເຍື່ອ

     ການວິເຄາະຕົວຢ່າງພາຍໃນ:

    o ຄວາມອຸດົມສົມບູນຂອງ Gene

    o Spot clustering, ລວມທັງການວິເຄາະຂະຫນາດຫຼຸດລົງ

    o ການວິເຄາະການສະແດງອອກທີ່ແຕກຕ່າງກັນລະຫວ່າງກຸ່ມ: ການກໍານົດພັນທຸກໍາຂອງເຄື່ອງຫມາຍ

    o ຄໍາບັນຍາຍທີ່ມີປະໂຫຍດແລະການເສີມສ້າງພັນທຸກໍາຂອງເຄື່ອງຫມາຍ

     ການວິເຄາະລະຫວ່າງກຸ່ມ

    o ການລວມເອົາຈຸດໆຈາກທັງສອງຕົວຢ່າງ (ຕົວຢ່າງ: ພະຍາດ ແລະ ການຄວບຄຸມ) ແລະ ເປັນກຸ່ມຄືນໃໝ່.

    o ການກໍານົດພັນທຸກໍາສໍາລັບແຕ່ລະກຸ່ມ

    o ຄໍາບັນຍາຍທີ່ມີປະໂຫຍດແລະການເສີມສ້າງພັນທຸກໍາຂອງເຄື່ອງຫມາຍ

    o ການສະແດງອອກຄວາມແຕກຕ່າງຂອງກຸ່ມດຽວກັນລະຫວ່າງກຸ່ມ

    ການວິເຄາະຕົວຢ່າງພາຍໃນ

    ການຈັດກຸ່ມຈຸດ

    10x (10)

     

    ການກໍານົດພັນທຸກໍາຂອງເຄື່ອງຫມາຍແລະການແຈກຢາຍທາງກວ້າງຂອງພື້ນ

     

    10x (12)

    10x (11)

     

    ການວິເຄາະລະຫວ່າງກຸ່ມ

    ການປະສົມປະສານຂໍ້ມູນຈາກທັງສອງກຸ່ມ ແລະກຸ່ມຄືນໃໝ່

    10x (13)

     

     

    ເຄື່ອງຫມາຍພັນທຸກໍາຂອງກຸ່ມໃຫມ່

    图片5

    ສຳຫຼວດຄວາມກ້າວໜ້າທີ່ອຳນວຍຄວາມສະດວກໂດຍການບໍລິການ transcriptomics spatial ຂອງ BMKGene ໂດຍ 10X Visium ໃນສິ່ງພິມທີ່ໂດດເດັ່ນເຫຼົ່ານີ້:

    Chen, D. et al. (2023) 'mthl1, ເປັນ homologue Drosophila ທີ່ມີທ່າແຮງຂອງ GPCRs ການຍຶດຂອງສັດລ້ຽງລູກດ້ວຍນົມແມ່, ມີສ່ວນຮ່ວມໃນປະຕິກິລິຍາຕ້ານເນື້ອງອກຕໍ່ຈຸລັງ oncogenic ທີ່ຖືກສີດຢູ່ໃນແມງວັນ,ການດໍາເນີນຄະດີຂອງສະພາວິທະຍາສາດແຫ່ງຊາດຂອງສະຫະລັດອາເມລິກາ, 120(30), ໜ້າ. e2303462120. doi: /10.1073/pnas.2303462120

    Chen, Y. et al. (2023) 'STEEL ເປີດໃຊ້ຄວາມລະອຽດສູງຂອງຂໍ້ມູນ spatiotemporal transcriptomic',ສະຫຼຸບຫຍໍ້ໃນ Bioinformatics, 24(2), ໜ້າ 1–10. doi: 10.1093/BIB/BBAD068.

    Liu, C. et al. (2022) 'Atlas spatiotemporal ຂອງ organogenesis ໃນການພັດທະນາດອກກ້ວຍໄມ້',ການຄົ້ນຄວ້າອາຊິດນິວເຄຼຍ, 50(17), ໜ້າ 9724–9737. doi: 10.1093/NAR/GKAC773.

    Wang, J. et al. (2023) 'ການລວມເອົາການຖ່າຍທອດທາງກວ້າງຂອງພື້ນ ແລະການຈັດລໍາດັບ RNA ແກນດ່ຽວ ເປີດເຜີຍຍຸດທະສາດການປິ່ນປົວທີ່ມີທ່າແຮງສໍາລັບ Uterine Leiomyoma',ວາລະສານສາກົນຂອງວິທະຍາສາດຊີວະພາບ, 19(8), ໜ້າ 2515–2530. doi: 10.7150/IJBS.83510.

    ໄດ້ຮັບໃບສະເໜີລາຄາ

    ຂຽນຂໍ້ຄວາມຂອງທ່ານທີ່ນີ້ແລະສົ່ງໃຫ້ພວກເຮົາ

    ສົ່ງຂໍ້ຄວາມຂອງທ່ານໄປຫາພວກເຮົາ: