●Majukwaa:Illumina NovaSeq 6000 na NovaSeq X Plus
●Njia za mpangilio:PE150 na PE250
●Udhibiti wa ubora wa maktaba kabla ya kupanga mpangilio
●Kupangilia QC ya data na uwasilishaji:Uwasilishaji wa ripoti ya QC na data ghafi katika umbizo la fastq baada ya kutenganisha na kuchuja usomaji wa Q30
●Utofauti wa huduma za Mfuatano:Mteja anaweza kuchagua kupanga kwa mpangilio wa njia, seli ya mtiririko, au kwa kiasi cha data kinachohitajika (mfuatano wa njia isiyo kamili).
●Uzoefu mkubwa kwenye jukwaa la ufuatiliaji wa Illumina:na maelfu ya miradi iliyofungwa yenye spishi mbalimbali.
●Uwasilishaji wa ripoti ya QC ya mpangilio:pamoja na vipimo vya ubora, usahihi wa data na utendaji wa jumla wa mradi wa mpangilio.
●Mchakato wa mpangilio wa watu wazima:kwa muda mfupi wa kugeuka.
●Udhibiti Mkali wa Ubora: Tunatekeleza mahitaji madhubuti ya QC ili kuhakikisha utoaji wa matokeo ya ubora wa hali ya juu kila wakati.
| Jukwaa | Seli ya Mtiririko | Hali ya mpangilio | Kitengo | Makadirio ya matokeo |
| NovaSeq X | 10B (njia 8) | PE150 | Njia Moja Njia ya Sehemu | 375Gb / Njia |
| 25B (njia 8) | PE150 | Njia Moja Njia ya Sehemu | 1000 Gb/Njia | |
| NovaSeq 6000 | Seli ya mtiririko wa SP (njia 2) | PE250 | Seli ya Mtiririko Njia Moja Njia ya Sehemu | Usomaji wa mita 325-400 / Njia |
| Seli ya mtiririko wa S4 (njia 4) | PE150 | Seli ya Mtiririko Njia Moja Njia ya Sehemu | ~800 Gb / Njia |
| Kiasi cha Data (Gb) | Kiunganishi (qPCR) PE150 | Kiunganishi (qPCR) PE250 | Kiasi | |
| Njia ya Sehemu
| G ≤ 10 | ≥ 1 nM | ≥ 2nM | ≥ 25 μl |
| 10 < G ≤ 50 | ≥ 2 nM | ≥ 3nM | ≥ 25 μl | |
| 50 < G ≤ 100 | ≥ 3 nM | ≥ 4nM | ≥ 25 μl | |
| G > 100 | ≥ 4 nM | ≥ 4nM | ≥ 25 μl | |
| Njia Moja | Kwa Kila Njia | ≥ 1.5 nM/bwawa la maktaba | ≥ 2 nM/bwawa la maktaba | ≥ 25 µL/Dimbwi la Maktaba |
Mbali na mkusanyiko na jumla ya kiasi, muundo unaofaa wa kilele pia unahitajika.
Kumbuka: Upangaji wa njia za maktaba zenye utofauti mdogo unahitaji uongezaji wa PhiX ili kuhakikisha upigaji kura imara.
Tunapendekeza kuwasilisha maktaba zilizounganishwa tayari kama sampuli za mpangilio wa njia. Ukihitaji BMKGENE kufanya mpangilio wa njia za maktaba, tafadhali rejelea mahitaji ya maktaba ya mpangilio wa njia zisizo kamili.
Kwa mpangilio wa PE150, ukubwa wa ingizo unapaswa kuwa bp 300–400 (bila kujumuisha adapta); kwa mpangilio wa PE250, ukubwa wa ingizo unapaswa kuwa bp 150–500 (bila kujumuisha adapta).
Maktaba zinapaswa kuwa na kilele kimoja kikuu, bila uchafuzi wa adapta na bila vipimo vya primer.
Ripoti kuhusu ubora wa maktaba hutolewa kabla ya kupanga mfuatano, kutathmini kiasi cha maktaba, na kugawanyika.
Jedwali 1. Takwimu kuhusu data ya mpangilio.
| Kitambulisho cha Mfano | BMKID | Masomo ghafi | Data Mbichi (bp) | Masomo safi (%) | Q20(%) | Q30(%) | GC(%) |
| C_01 | BMK_01 | 22,870,120 | 6,861,036,000 | 96.48 | 99.14 | 94.85 | 36.67 |
| C_02 | BMK_02 | 14,717,867 | 4,415,360,100 | 96.00 | 98.95 | 93.89 | 37.08 |
Mchoro 1. Usambazaji wa ubora pamoja na usomaji katika kila sampuli
Mchoro 2. Usambazaji wa maudhui ya msingi
Mchoro 3. Usambazaji wa maudhui ya kusoma katika data ya mpangilio