条形banner-03

Hua

10x Genomics Visium Spatial Transcriptome

Ko te transcriptomics mokowhiti he hangarau hou e taea ai e nga kairangahau te tirotiro i nga tauira whakaaturanga ira i roto i nga kopa me te pupuri i o raatau horopaki mokowā. Ko tetahi papaahi kaha i tenei rohe ko te 10x Genomics Visium me te raupapa Illumina. Ko te maataapono o te 10X Visium kei runga i tetahi maramara motuhake me te waahi hopu kua tohua hei whakanoho i nga waahanga kiko. Kei roto i tenei waahi hopu nga waahi tohu, e rite ana ki tetahi waahi mokowā motuhake i roto i te kiko. Ko nga ngota ngota RNA i hopukina mai i te kiko ka tapaina ki nga tohu molecular identifiers (UMIs) i roto i te tukanga whakawhiti whakamuri. Ko enei waahi tohu me nga UMI ka taea te mapi mokowā me te inenga o te whakaaturanga ira i te taumira o te pūtau kotahi. Ko te whakakotahitanga o nga tauira mokowhiti mokowhiti me nga UMI ka whakarite i te tika me te motuhake o nga raraunga i hangaia. Ma te whakamahi i tenei hangarau Spatial Transcriptomics, ka hohonu ake te maarama o nga kairangahau ki te whakahaere mokowā o nga pūtau me nga taunekeneke irapoi matatini e puta ana i roto i nga kopa, e whakaatu ana i nga whakaaro nui ki nga tikanga e whai ana i nga mahi koiora i roto i nga waahi maha, tae atu ki te oncology, neuroscience, te koiora whanaketanga, immunology. , me nga rangahau huaota.

Paerewa: 10X Genomics Visium me Illumina NovaSeq


Nga Taipitopito Ratonga

Bioinformatics

Hua Whakaaturanga

Ko nga whakaputanga kua tohua

Kaupapa Hangarau

图片2(1)-01

Ngā āhuatanga

● Whakatau: 100 µM

● Te Taonenga Wahi: 55 µM

● Te maha o nga waahi: 4992

● Te horahanga hopu: 6.5 x 6.5 mm

● Ko ia waahi tohu ka utaina ki nga waahanga tuatahi e 4 nga waahanga:

- poly(dT) hiku mo te mRNA priming me te cDNA synthesis

- Tautuhi Molecular Unique (UMI) hei whakatika i te rītaha whakakaha

- Waehere pae mokowā

- Te raupapa herenga o te panui wahanga 1 te raupapa tuatahi

● Waiwai H&E o nga waahanga

Nga painga

Ratonga Kotahi: ka whakauru i nga wheako katoa me nga mahi e pa ana ki nga pukenga, tae atu ki te wehewehe tangihanga, te whakakoi, te arotautanga o te kiko, te tohu tohu mokowhiti, te whakarite whare pukapuka, te raupapa me te bioinformatics.

● Tiima Hangarau tino mohio: me te wheako ki runga i te 250 momo kiko me te 100+ momo tae atu ki te tangata, kiore, whakangote, ika me nga tipu.

Whakahōu wā-tūturu mo te Kaupapa Katoa: me te mana katoa o te ahunga whakamua whakamatautau.

Matawhānui Paerewa Bioinformatics:Kei roto i te kete 29 tātaritanga me te 100+ o te kounga teitei.

Te Tatari Raraunga Whakaritea me te Whakaaturanga: e wātea ana mo nga tono rangahau rereke.

Kōwhiringa Tātari Hononga me te Whakaraupapa mRNA pūtau-kotahi

Whakatakotoranga

Nga Whakaritenga Tauira

Whare Pukapuka

Rautaki raupapa

Raraunga e taunaki ana

Mana Kounga

Ko nga tauira cryo kua whakauruhia ki te OCT

(Tamita tino pai: tata ki te 6x6x6 mm³)

2 poraka mo ia tauira

10X Visium cDNA whare pukapuka

Ilumina PE150

50K PE panui mo ia waahi

(60Kb)

RIN> 7

Mo te roanga atu o nga korero mo te aratohu whakarite tauira me te rerenga mahi ratonga, tena koa korero ki a

Rerengamahi Ratonga

I roto i te waahanga whakarite tauira, ka mahia he whakamatautau tangohanga RNA nuinga tuatahi kia taea ai te whiwhi RNA kounga teitei. I roto i te waahanga arotautanga kiko ka pokea nga waahanga ka whakaatahia, ka whakatikahia nga tikanga mo te tuku mRNA mai i te kiko. Ka whakamahia te kawa kua arotautia i te wa e hanga ana i te whare pukapuka, ka whai i te raupapatanga me te tātari raraunga.

Ko te rerenga mahi ratonga ka uru ki nga whakahoutanga wa-tūturu me nga whakapumautanga a te kiritaki kia mau tonu ai te urupare urupare, kia pai ai te mahi kaupapa.

图片4

  • Tōmua:
  • Panuku:

  • 流程图1.15-02

     

    Kei roto ko te tātaritanga e whai ake nei:

     Mana Kounga Raraunga:

    o Putanga raraunga me te tohatoha kaute kounga

    o Te kitenga ira mo ia waahi

    o Te kapi o te kopa

     Tātari-tauira-roto:

    o Taonga ira

    o Whakarapu wahi, tae atu ki te tātari inenga iti

    o Te tātari korero rereke i waenga i nga tautau: te tautuhi i nga ira tohu

    o Te tuhi korero me te whakarangatira i nga ira tohu

     Te tātari i waenga-rōpū

    o Te whakakotahi ano i nga waahi mai i nga tauira e rua (hei tauira. te mate me te whakahaere) me te kapoipu ano

    o Te tautuhi i nga ira tohu mo ia tautau

    o Te tuhi korero me te whakarangatira i nga ira tohu

    o Whakaaturanga Rerekētanga o te kāhui kotahi i waenga i nga roopu

    Tātari-tauira-roto

    Whakarapu wahi

    10x (10)

     

    Te tautuhi ira tohu me te tohatoha mokowā

     

    10x (12)

    10x (11)

     

    Te tātari i waenga-rōpū

    Pahekotanga raraunga mai i nga roopu e rua me te kapoipu ano

    10x (13)

     

     

    Nga ira tohu o nga tautau hou

    图片5

    Tuwherahia nga ahunga whakamua i mahia e te ratonga mokowhiti a BMKGene na 10X Visium I roto i enei whakaputanga rongonui:

    Chen, D. et al. (2023) 'mthl1, he Drosophila homologue pea o nga GPCR adhesion mammalian, kei roto i nga tauhohenga antitumor ki nga pūtau oncogenic i werohia i roto i nga namu',Nga Mahi a te National Academy of Sciences of the United States of America, 120(30), wh. e2303462120. doi: /10.1073/pnas.2303462120

    Chen, Y. et al. (2023) 'Ka taea e STEEL te whakatauira teitei o nga raraunga whakawhiti mokowhiti',Nga korero mo te Bioinformatics, 24(2), api 1–10. doi: 10.1093/BIB/BBAD068.

    Liu, C. et al. (2022) 'He atlas spatiotemporal o te organogenesis i te whanaketanga o nga puawai orchid',Rangahau Waikawa Nucleic, 50(17), wh.9724–9737. doi: 10.1093/NAR/GKAC773.

    Wang, J. et al. (2023) 'Ko te Whakakotahi i te Transcriptomic Spatial and Single-nucleus RNA Sequencing e whakaatu ana i nga Rautaki Whakaora Pumanawa mo te Uterine Leiomyoma',International Journal of Biological Sciences, 19(8), api 2515–2530. doi: 10.7150/IJBS.83510.

    whiwhi korero

    Tuhia to korero ki konei ka tukuna mai ki a matou

    Tukuna mai to korero ki a matou: