د واحدې هستې د RNA تسلسل
تخنیکي سکیم
د هستې جلا کول د 10× جینومکس کرومیم ™ لخوا ترلاسه کیږي، کوم چې د دوه ګوني کراسنګونو سره د اتو چینل مایکرو فلوایډکس سیسټم څخه جوړ دی. پدې سیسټم کې، د بارکوډونو او پرائمر، انزایمونو او یو واحد هستې سره د جیل مڼې د نانو لیټر په اندازه د تیلو څاڅکي کې پوښل شوي، د جیل مڼې-ان-ایمولشن (GEM) تولیدوي. یوځل چې GEM جوړ شي، د حجرو تحلیل او د بارکوډونو خوشې کول په هر GEM کې ترسره کیږي. mRNA د 10× بارکوډونو او UMI سره د cDNA مالیکولونو ته برعکس لیکل شوي، کوم چې نور د معیاري ترتیب کتابتون جوړونې تابع دي.
ځانګړتیاوې
● د کنګل شویو نسجونو څخه د واحد هستې تعلیق چمتو کول.
● د جیل بیډ-ان-ایمولشن (GEM) جوړښت چې د cDNA ترکیب تعقیبوي.
● په GEM کې هر مڼۍ د څلورو برخو څخه جوړ شوي پرائمرونو سره بار شوې ده:
د mRNA پریمینګ او cDNA ترکیب لپاره پولی (dT) لکۍ،
د امپلیفیکیشن تعصب سمولو لپاره ځانګړی مالیکولر پیژندونکی (UMI)
۱۰x بارکوډ
د جزوي لوستلو ۱ ترتیب پرائمر د تړلو ترتیب
ګټې
د واحدې هستې RNA ترتیب د واحدې حجرې RNA ترتیب محدودیتونه له منځه وړي، چې دا وړتیا ورکوي:
● د کنګل شویو نمونو کارول او یوازې تازه نمونو پورې محدود نه دي
● د کنګل شویو حجرو ټیټ فشار د تازه حجرو د انزایمیک درملنې په پرتله، چې د ټرانسکرپټوم معلوماتو کې د لږ فشار هڅول شوي جینونو په بڼه منعکس کیږي.
● د سره وینې حجرو د لرې کولو لپاره هیڅ اړتیا نشته.
● د حجرو لامحدود قطر
● د نمونو لویه لړۍ چې د تحلیل لپاره وړ دي، په شمول د پیچلو او نازکو نسجونو ډولونه چې د نسجونو د جلا کیدو پرمهال د حجرو د راټولیدو یا ویجاړیدو سره مخ دي.
هغه نمونې چې د واحد حجروي RNA ترتیب له لارې نشي تحلیل کیدی او د واحد هستوي RNA ترتیب لپاره وړ دي:
| حجره / نسج | دلیل |
| تازه کنګل شوی نسج | د نويو یا اوږدمهاله خوندي شویو سازمانونو د ترلاسه کولو توان نلري |
| د عضلاتو حجرات، میګاکاریوسایټ، غوړ… | د حجرو قطر ډېر لوی دی چې آلې ته ننوځي |
| ځيګر… | ډېر نازک چې مات نشي، د واحد حجرو توپیر نشي کولی |
| د عصبي حجرو، دماغ… | ډیر حساس، په اسانۍ سره فشار ورکول کیدی شي، د ترتیب پایلې به بدل کړي |
| پانقراس، تایرایډ… | د انډوجینس انزایمونو بډایه، د واحد حجرو تعلیق تولید اغیزه کوي |
د واحدې حجرې په مقابل کې د واحدې هستې توپیر
| واحد هسته | واحد حجروي |
| د حجرو نامحدود قطر | د حجرو قطر: ۱۰-۴۰ μm |
| مواد کولی شي کنګل شوي نسج وي | مواد باید تازه نسج وي |
| د کنګل شویو حجرو ټیټ فشار | د انزایم درملنه ممکن د حجرو فشار غبرګون رامینځته کړي |
| د وینې سره حجرات لرې کولو ته اړتیا نشته | د وینې سره حجرات باید لرې شي |
| هستوي بایومعلومات څرګندوي | ټوله حجره بایومعلومات څرګندوي |
مشخصاتو
| د نمونې اړتیاوې | کتابتون | د ترتیب کولو ستراتیژي | سپارښتنه شوې معلومات | د کیفیت کنټرول |
| د څارویو نسج ≥ 200 ملی ګرامه د نبات نسج ≥ 400 ملی ګرامه | ۱۰x جینومکس sn cDNA کتابتون | ایلومینا PE150 | په هر حجره کې ۱۰۰K PE لوستل (۱۰۰-۲۰۰ جي بي) | د مایکروسکوپ لاندې د ۷۰۰-۱۲۰۰ هستې/μl او هستې بشپړتیا لیدل شوې |
د نمونې چمتو کولو لارښوونې او د خدماتو کاري فلو په اړه د نورو جزیاتو لپاره، مهرباني وکړئ د یو سره خبرې وکړئد BMKGENE متخصص
د خدماتو کاري جریان
لاندې تحلیلونه پکې شامل دي:
● د کیفیت کنټرول: د حجرو شمیر، د جین کشف، د حجرو دقیق پیژندنه، د RNA مالیکولونه او د اظهار اندازه کول
● د داخلي نمونې تحلیل:
د حجرو کلستر کول او د کلستر تشریح
د توپیري اظهار تحلیل: په کلسترونو کې د DEGs پیژندنه
د کلستر DEGs فعال تشریح او بډایه کول
● د ګروپونو ترمنځ تحلیل:
د معلوماتو ترکیب
د توپیري اظهار تحلیل: په ډلو کې د DEGs پیژندنه
د ګروپ DEGs فعال تشریح او بډایه کول
● پرمختللې تحلیل:
د حجرو د دوران تحلیل
جعلي وخت تحلیل
د حجروي اړیکو تحلیل (سیل فون ډي بي)
د جین سیټ غني کولو تحلیل (GSEA)
د داخلي نمونې تحلیل
د حجرو کلستر کول:
د توپیري اظهار تحلیل: د کلستر DEGs
د ګروپونو ترمنځ تحلیل
د توپیري اظهار تحلیل: د ګروپ DEGs
پرمختللی تحلیل:
جعلي وخت تحلیل:
د حجرو دورې تحلیل:
په دې ځانګړو خپرونو کې د 10X کرومیم لخوا د BMKGene د واحد-نیوکلیوس RNA ترتیب خدماتو لخوا اسانه شوي پرمختګونه وپلټئ:
وانګ، ایل. او نور (۲۰۲۱) 'د واحد حجرو ټرانسکرپټومیک تحلیل د سټرایډ مقاومت لرونکي دمې د زیاتوالي په وخت کې د سږو معافیتي منظره څرګندوي'،د امریکا د متحده ایالاتو د علومو د ملي اکاډمۍ اجراات، ۱۱۸(۲)، مخ. e۲۰۰۵۵۹۰۱۱۸. doi: ۱۰.۱۰۷۳/pnas.۲۰۰۵۵۹۰۱۱۸
ژینګ، ایچ. او نور (۲۰۲۲) 'د قبرونو ناروغۍ او د هاشموتو تایرایډایټس په مایکرو چاپیریال کې د معافیت حجرو کې د غیر منظم جین څرګندولو او غیر معمولي میټابولیک سیګنال کولو لپاره یوه نړیواله تنظیمي شبکه'،په معافیت کې سرحدونه، 13، مخ. 879824. doi: 10.3389/FIMMU.2022.879824/BIBTEX.
تیان، ایچ. او نور (۲۰۲۳) 'د واحد حجرو ټرانسکرپټوم د فلاونډرز (پارالیچتیس اولیوسیوس) کې د غیر فعال شوي اډوارډسیلا ټارډا سره د واکسین کولو وروسته د لیوکوسایټونو متفاوتیت او معافیتي غبرګونونه کشفوي'،د اوبو کرنه، ۵۶۶، مخ ۷۳۹۲۳۸. doi: ۱۰.۱۰۱۶/J.AQUACULTURE.۲۰۲۳.۷۳۹۲۳۸.
یو، وای او نور (۲۰۲۳) 'فوټوډینامیک درملنه د معدې سرطان ناروغانو کې د تومور ضد معافیت بیا رغولو له لارې د معافیت پوستې مخنیوی کونکو پایلې ښه کوي'،د معدې سرطان، 26(5)، مخونه 798–813. doi: 10.1007/S10120-023-01409-X/METRICS.
