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Séquençage long non codant - Illumina

Les ARN longs non codants (ARNnc) sont des ARN de plus de 200 nucléotides possédant un potentiel de codage minimal et constituant des éléments essentiels de la famille des ARN non codants. Présents dans le noyau et le cytoplasme, ces ARN jouent un rôle crucial dans la régulation épigénétique, transcriptionnelle et post-transcriptionnelle, soulignant leur importance dans la modulation des processus cellulaires et moléculaires. Le séquençage des ARNnc représente un outil puissant pour l'étude de la différenciation cellulaire, de l'ontogenèse et des maladies humaines.

Plateforme : Illumina NovaSeq X


Détails du service

Bioinformatique

Résultats de la démo

Publications en vedette

Avantages du service

Analyse conjointe des ARNm et des ARNncEn combinant la quantification des transcrits d'ARNm avec l'étude des ARNnc et de leurs cibles, il est possible d'obtenir une vue d'ensemble approfondie du mécanisme de régulation sous-jacent à la réponse cellulaire.

Expertise approfondieNous avons traité plus de 230 000 échantillons, couvrant une grande variété d'objectifs de projets et d'échantillons. Nous mettons notre vaste expertise au service de chaque projet.

Analyse conjointe des ARNm et des ARNncNous combinons la quantification des transcrits d'ARNm avec l'étude des ARNnc et de leurs cibles, ce qui permet d'obtenir une vue d'ensemble approfondie du mécanisme de régulation sous-jacent à la réponse cellulaire.

Contrôle qualité rigoureuxNous mettons en œuvre des points de contrôle essentiels à chaque étape, de la préparation des échantillons à la préparation des banques, en passant par le séquençage et la bioinformatique. Notre suivi rigoureux garantit des résultats d'une qualité constante.

Annotation complèteNous utilisons plusieurs bases de données pour annoter fonctionnellement les gènes différentiellement exprimés (DEG) et réaliser les analyses d'enrichissement correspondantes. Cette approche exhaustive permet de mieux comprendre les processus cellulaires et moléculaires sous-jacents à la réponse du transcriptome, vous assurant ainsi d'obtenir toutes les informations possibles sur les données de votre expérience.

Assistance après-venteNous comprenons l'importance de la présence et c'est pourquoi notre engagement se prolonge au-delà de la finalisation du projet grâce à un service après-vente de 3 mois. Pendant cette période, nous assurons le suivi du projet, l'assistance au dépannage et des séances de questions-réponses pour répondre à toutes vos interrogations concernant les résultats.

Exigences et modalités de livraison des échantillons

Bibliothèque

Plate-forme

Données recommandées

Contrôle qualité des données

bibliothèque directionnelle appauvrie en ARNr

Illumina PE150

10-16 Go

Q30≥85%

Nucléotides :

Conc. (ng/μl)

Quantité (µg)

Pureté

Intégrité

≥ 80

≥ 0,8

OD260/280=1,7-2,5

OD260/230=0,5-2,5

Contamination protéique ou ADN limitée ou absente sur le gel.

RIN≥6,0 ;

5,0≥28S/18S≥1,0 ;

élévation de base limitée ou inexistante

● Plantes :

Racine, tige ou pétale : 450 mg

Feuille ou graine : 300 mg

Fruit : 1,2 g

● Animal :

Cœur ou intestin : 450 mg

Viscères ou cerveau : 240 mg

Muscle : 600 mg

Os, cheveux ou peau : 1,5 g

● Arthropodes :

Insectes : 9 g

Crustacés : 450 mg

● Sang total :2 tubes

● Cellules: 106 cellules

● Sérum et plasma: 6 mL

Livraison d'échantillons recommandée

Récipient : tube à centrifuger de 2 ml (le papier aluminium n’est pas recommandé).

Étiquetage des exemples : Groupe + réplique, par exemple A1, A2, A3 ; B1, B2, B3.

Expédition:

1. Glace carbonique : Les échantillons doivent être emballés dans des sacs et enfouis dans de la glace carbonique.

2. Tubes RNAstable : les échantillons d'ARN peuvent être séchés dans un tube de stabilisation d'ARN (par exemple RNAstable®) et expédiés à température ambiante.

Flux de travail du service

Contrôle qualité des échantillons

Conception expérimentale

livraison d'échantillons

Livraison d'échantillons

Expérience pilote

Extraction d'ARN

Préparation de la bibliothèque

Construction de bibliothèques

Séquençage

Séquençage

Analyse des données

Analyse des données

Services après-vente

Services après-vente


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  • Bioinformatique

    wps_doc_12

     

    • Données brutes
    • Contrôle qualité des données
    • Alignement du génome
    • Structure des gènes (épissage alternatif, optimisation de la structure des gènes et prédiction de nouveaux gènes)
    • quantification de l'expression génique
    • Analyse d'expression différentielle
    • Annotation et enrichissement des gènes différentiellement exprimés + Gènes cibles des lncRNA différentiellement exprimés
    • Identification du relevé de notes
    • Identification des lncRNA (conservation des lncRNA et lncRNA connus)
    • prédiction des gènes cibles des lncRNA
    • quantification de l'expression des lncRNA
    • Analyse conjointe avec les données d'ARNm

    Analyse de l'expression différentielle des gènes (DEGs)

     

     Image 30

     

     

    Quantification de l'expression des lncRNA – regroupement

     

    Image 31 

     

    Enrichissement des gènes cibles des lncRNA

     

     Image 32

     

    Analyse conjointe de la position des ARNm et des ARNlnc – Diagramme Circos (le cercle central représente l'ARNm et le cercle intérieur l'ARNlnc)

     

     photo33

    Explorez les avancées permises par les services de séquençage d'ARNnc de BMKGene à travers une collection de publications soigneusement sélectionnées.

     

    Ji, H. et al. (2020) « Identification, prédiction fonctionnelle et vérification des principaux lncRNA liés au stress du froid dans le foie des rats »,Rapports scientifiques2020 10:1, 10(1), pp. 1–14. doi: 10.1038/s41598-020-57451-7.

    Jia, Z. et al. (2021) « L’analyse transcriptomique intégrative révèle le mécanisme immunitaire d’une souche de carpe commune résistante au CyHV-3 »,Frontières de l'immunologie, 12, p. 687151. est ce que je : 10.3389/FIMMU.2021.687151/BIBTEX.

    Wang, XJ et al. (2022) « Priorisation basée sur l'intégration multi-omique des réseaux de régulation d'ARN endogènes concurrents dans le cancer du poumon à petites cellules : caractéristiques moléculaires et candidats médicaments »,Frontières en oncologie, 12, p. 904865. est ce que je : 10.3389/FONC.2022.904865/BIBTEX.

    Xiao, L. et al. (2020) « Dissection génétique du réseau de coexpression génique sous-jacent à la photosynthèse chez Populus »,Journal de biotechnologie végétale, 18(4), pp. 1015–1026. doi: 10.1111/PBI.13270.

    Zheng, H. et al. (2022) « Un réseau de régulation global pour l'expression génique dérégulée et la signalisation métabolique anormale dans les cellules immunitaires dans le microenvironnement de la maladie de Graves et de la thyroïdite de Hashimoto »,Frontières de l'immunologie, 13, p. 879824. est ce que je : 10.3389/FIMMU.2022.879824/BIBTEX.

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