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Secuenciación larga no codificante - Illumina

Los ARN largos no codificantes (ARNlnc) tienen más de 200 nucleótidos de longitud, poseen un potencial codificante mínimo y son elementos fundamentales dentro del ARN no codificante. Presentes en el núcleo y el citoplasma, estos ARN desempeñan funciones cruciales en la regulación epigenética, transcripcional y postranscripcional, lo que subraya su importancia en la configuración de los procesos celulares y moleculares. La secuenciación de ARNlnc es una herramienta poderosa en la diferenciación celular, la ontogénesis y las enfermedades humanas.

Plataforma: Illumina NovaSeq X


Detalles del servicio

Bioinformática

Resultados de la demostración

Publicaciones destacadas

Ventajas del servicio

Análisis conjunto de ARNm y ARNlncAl combinar la cuantificación de las transcripciones de ARNm con el estudio de lncRNA y sus objetivos, es posible obtener una visión detallada del mecanismo regulador subyacente a la respuesta celular.

Amplia experienciaHemos procesado más de 230.000 muestras, abarcando diversos objetivos de muestras y proyectos. Aportamos nuestra vasta experiencia a cada proyecto.

Análisis conjunto de ARNm y ARNlncCombinamos la cuantificación de transcripciones de ARNm con el estudio de lncRNA y sus dianas, lo que permite obtener una visión en profundidad del mecanismo regulador subyacente a la respuesta celular.

Control de calidad rigurosoImplementamos controles fundamentales en todas las etapas, desde la preparación de muestras hasta la preparación de bibliotecas, la secuenciación y la bioinformática. Nuestro meticuloso seguimiento garantiza la entrega de resultados consistentemente de alta calidad.

Anotación completaUtilizamos múltiples bases de datos para anotar funcionalmente los Genes de Expresión Diferencial (GED) y realizar los análisis de enriquecimiento correspondientes. Este enfoque integral proporciona información sobre los procesos celulares y moleculares que subyacen a la respuesta del transcriptoma, garantizando así que obtenga toda la información posible sobre los datos de su experimento.

Soporte posventaEntendemos la importancia de estar presentes, por eso nuestro compromiso se extiende más allá de la finalización del proyecto con un servicio posventa de 3 meses. Durante este tiempo, ofrecemos seguimiento del proyecto, asistencia para la resolución de problemas y sesiones de preguntas y respuestas para resolver cualquier duda relacionada con los resultados.

Requisitos de muestra y entrega

Biblioteca

Plataforma

Datos recomendados

Control de calidad de datos

Biblioteca direccional agotada de ARNr

Illumina PE150

10-16 GB

Q30≥85%

Nucleótidos:

Concentración (ng/μl)

Cantidad (μg)

Pureza

Integridad

≥ 80

≥ 0,8

OD260/280=1,7-2,5

DO260/230=0,5-2,5

Se muestra contaminación limitada o nula de proteínas o ADN en el gel.

RIN≥6,0;

5,0≥28S/18S≥1,0;

elevación basal limitada o nula

● Plantas:

Raíz, tallo o pétalo: 450 mg

Hoja o semilla: 300 mg

Fruta: 1,2 g

●Animal:

Corazón o Intestino: 450 mg

Vísceras o cerebro: 240 mg

Músculo: 600 mg

Huesos, cabello o piel: 1,5 g

● Artrópodos:

Insectos: 9g

Crustáceos: 450 mg

● Sangre entera:2 tubos

● Células: 106 células

● Suero y Plasma:6 ml

Entrega de muestra recomendada

Envase: Tubo de centrífuga de 2 ml (no se recomienda usar papel de aluminio)

Etiquetado de muestra: Grupo+réplica p.ej. A1, A2, A3; B1, B2, B3.

Envío:

1. Hielo seco: Las muestras deben empacarse en bolsas y enterrarse en hielo seco.

2. Tubos de estabilización de ARN: las muestras de ARN pueden secarse en un tubo de estabilización de ARN (por ejemplo, RNAstable®) y enviarse a temperatura ambiente.

Flujo de trabajo del servicio

Control de calidad de muestra

Diseño de experimentos

entrega de muestra

Entrega de muestra

Experimento piloto

Extracción de ARN

Preparación de la biblioteca

Construcción de biblioteca

Secuenciación

Secuenciación

Análisis de datos

Análisis de datos

Servicios posventa

Servicios posventa


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  • Bioinformática

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    • Datos sin procesar
    • Control de calidad de datos
    • Alineación del genoma
    • Estructura genética (empalme alternativo, optimización de la estructura genética y predicción de nuevos genes)
    • cuantificación de la expresión génica
    • Análisis de expresión diferencial
    • Anotación y enriquecimiento de DEG + Genes diana de lncRNA expresados ​​diferencialmente
    • Identificación de la transcripción
    • Identificación de lncRNA (conservación de lncRNA y lncRNA conocido)
    • Predicción de genes diana del lncRNA
    • cuantificación de la expresión de lncRNA
    • Análisis conjunto con datos de ARNm

    Análisis de expresión génica diferencial (GED)

     

     图片30

     

     

    Cuantificación de la expresión de lncRNA – agrupamiento

     

    foto 31 

     

    Enriquecimiento de genes diana de lncRNA

     

     foto 32

     

    Análisis de la posición conjunta del ARNm y el ARNlnc: gráfico de Circos (el círculo central es el ARNm y el círculo interior es el ARNlnc)

     

     foto 33

    Explore los avances facilitados por los servicios de secuenciación de lncRNA de BMKGene a través de una colección seleccionada de publicaciones.

     

    Ji, H. et al. (2020) 'Identificación, predicción funcional y verificación clave de lncRNA relacionados con el estrés por frío en el hígado de ratas',Informes científicos2020 10:1, 10(1), págs. 1–14. doi: 10.1038/s41598-020-57451-7.

    Jia, Z. et al. (2021) 'El análisis transcriptómico integrativo revela el mecanismo inmunológico de una cepa de carpa común resistente a CyHV-3',Fronteras en inmunología, 12, pág. 687151. doi: 10.3389/FIMMU.2021.687151/BIBTEX.

    Wang, XJ et al. (2022) 'Priorización basada en la integración multiómica de redes de regulación de ARN endógeno en competencia en el cáncer de pulmón de células pequeñas: características moleculares y candidatos a fármacos',Fronteras en Oncología, 12, pág. 904865. doi: 10.3389/FONC.2022.904865/BIBTEX.

    Xiao, L. et al. (2020) 'Disección genética de la red de coexpresión genética subyacente a la fotosíntesis en Populus',Revista de Biotecnología Vegetal, 18(4), págs. 1015–1026. doi: 10.1111/PBI.13270.

    Zheng, H. et al. (2022) 'Una red reguladora global para la expresión genética desregulada y la señalización metabólica anormal en células inmunes en el microambiente de la enfermedad de Graves y la tiroiditis de Hashimoto',Fronteras en inmunología, 13, pág. 879824. doi: 10.3389/FIMMU.2022.879824/BIBTEX.

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