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Ensamblaje del genoma basado en Hi-C

Hi-C es un método diseñado para capturar la configuración cromosómica combinando interacciones basadas en proximidad y secuenciación de alto rendimiento.Se cree que la intensidad de estas interacciones está correlacionada negativamente con la distancia física en los cromosomas.Por lo tanto, los datos de Hi-C podrían guiar la agrupación, ordenación y orientación de secuencias ensambladas en un borrador de genoma y anclarlas en una cierta cantidad de cromosomas.Esta tecnología permite el ensamblaje del genoma a nivel de cromosomas en ausencia de un mapa genético basado en la población.Cada genoma necesita un Hi-C.

Plataforma: Plataforma Illumina NovaSeq / DNBSEQ


Detalles del servicio

Resultados de la demostración

Caso de estudio

Ventajas del servicio

1Principio de secuenciación Hi-C

Descripción general de Hi-C
(Lieberman-Aiden E et al.,Ciencia, 2009)

● No es necesario construir una población genética para el anclaje contig;
● Una mayor densidad de marcadores conduce a una mayor proporción de anclaje de contigs, superior al 90%;
● Permite la evaluación y correcciones de conjuntos de genomas existentes;
● Tiempo de respuesta más corto con mayor precisión en el ensamblaje del genoma;
● Abundante experiencia con más de 1.000 bibliotecas Hi-C construidas para más de 500 especies;
● Más de 100 casos exitosos con un factor de impacto publicado acumulativo de más de 760;
● Ensamblaje del genoma poliploide basado en Hi-C; en el proyecto anterior se logró una tasa de anclaje del 100 %;
● Patentes internas y derechos de autor de software para experimentos de Hi-C y análisis de datos;
● Software de ajuste de datos visualizados de desarrollo propio que permite mover, revertir, revocar y rehacer bloques manualmente.

Especificaciones de servicio

 

Tipo de biblioteca

 

 

Plataforma


Longitud de lectura
Recomendar estrategia
Hola-C
Illumina NovaSeq
PE150
≥ 100X

Análisis bioinformáticos.

● Control de calidad de los datos sin procesar

● Control de calidad de la biblioteca Hi-C

● Ensamblaje del genoma basado en Hi-C

● Evaluación posterior al montaje

Flujo de trabajo HiC

Requisitos de muestra y entrega

Requisitos de muestra:

Animal
Hongo
Plantas

 

Tejido congelado: 1-2 g por biblioteca
Celdas: 1x 10^7 celdas por biblioteca
Tejido congelado: 1 g por biblioteca
Tejido congelado: 1-2 g por biblioteca

 

 
*Recomendamos encarecidamente enviar al menos 2 alícuotas (de 1 g cada una) para el experimento Hi-C.

Entrega de muestra recomendada

Envase: tubo de centrífuga de 2 ml (no se recomienda papel de aluminio)
Para la mayoría de las muestras, recomendamos no conservarlas en etanol.
Etiquetado de muestras: las muestras deben estar claramente etiquetadas y ser idénticas al formulario de información de muestra enviado.
Envío: Hielo seco: las muestras deben empaquetarse primero en bolsas y enterrarse en hielo seco.

Flujo de trabajo del servicio

Control de calidad de muestra

Diseño de experimentos

entrega de muestra

Entrega de muestra

experimento piloto

Extracción de ADN

Preparación de la biblioteca

construcción de biblioteca

Secuenciación

Secuenciación

Análisis de los datos

Análisis de los datos

Servicios postventa

Servicios postventa


  • Anterior:
  • Próximo:

  • *Los resultados de demostración que se muestran aquí provienen todos de genomas publicados con Biomarker Technologies.

    1.Mapa de calor de interacción Hi-C deCamptoteca acuminatagenoma.Como se muestra en el mapa, la intensidad de las interacciones se correlaciona negativamente con la distancia lineal, lo que indica un ensamblaje a nivel de cromosomas de alta precisión.(Relación de anclaje: 96,03%)

    3Mapa de calor de interacción Hi-C que muestra el anclaje de contigs en el ensamblaje del genoma

    Kang M et al.,Comunicaciones de la naturaleza, 2021

     

    2.Hi-C facilitó la validación de inversiones entreGossypium hirsutumL.TM-1 A06 yG. arboreumChr06

    4Mapa de calor Hi-C-facilita-la-revelación-de-inversiones-entre-genomas

    Yang Z y otros,Comunicaciones de la naturaleza, 2019

     

     

    3.Ensamblaje y diferenciación bialélica del genoma de yuca SC205.El mapa de calor Hi-C muestra una clara división en cromosomas homólogos.

    5Mapa de calor Hi-C que muestra cromosomas homólogos

    Hu W et al.,Planta molecular, 2021

     

     

    4.Mapa de calor Hi-C en el ensamblaje del genoma de dos especies de Ficus:F.microcarpa(relación de anclaje: 99,3%) yF.hispida (ratio de anclaje: 99,7%)
    6Mapa de calor Hi-C que muestra el anclaje contig de los genomas de Ficus

    Zhang X y otros,Celúla, 2020

     

     

    Caso BMK

    Los genomas del baniano y la avispa polinizadora proporcionan información sobre la coevolución de la avispa y el higo

    Publicado: Celúla, 2020

    Estrategia de secuenciación:

    F. microcarpa genoma: Aprox.84 X PacBio RSII (36,87 Gb) + Hi-C (44 Gb)

    F. hispidagenoma: Aprox.97 X PacBio RSII (36,12 Gb) + Hi-C (60 Gb)

    Eupristina verticillatagenoma: Aprox.170 X PacBio RSII (65 Gb)

    Resultados clave

    1. Se construyeron dos genomas de árbol de higuera y un genoma de avispa polinizadora utilizando secuenciación PacBio, Hi-C y mapa de ligamiento.
    (1)F. microcarpaGenoma: se estableció un ensamblaje de 426 Mb (97,7% del tamaño estimado del genoma) con un cóntig N50 de 908 Kb, puntuación BUSCO de 95,6%.En total, Hi-C ancló secuencias de 423 Mb a 13 cromosomas.La anotación del genoma arrojó 29.416 genes codificadores de proteínas.
    (2)F. HíspidaGenoma: Se produjo un conjunto de 360 ​​Mb (97,3% del tamaño estimado del genoma) con un contig N50 de 492 Kb y una puntuación BUSCO del 97,4%.Un total de secuencias de 359 Mb fueron ancladas en 14 cromosomas por Hi-C y altamente idénticas al mapa de ligamiento de alta densidad.
    (3)Eupristina verticillataGenoma: se estableció un conjunto de 387 Mb (tamaño estimado del genoma: 382 Mb) con un contig N50 de 3,1 Mb y una puntuación BUSCO del 97,7%.

    2. El análisis genómico comparativo reveló una gran cantidad de variaciones estructurales entre dosFicusgenomas, que proporcionaron un recurso genético invaluable para los estudios de evolución adaptativa.Este estudio, por primera vez, proporcionó información sobre la coevolución de la avispa higuera a nivel genómico.

    PB-estudio-de-caso-de-secuenciación-de-ARN-completo-de-longitud-completa

    Diagrama circos sobre características genómicas de dos.FicusGenomas, incluidos cromosomas, duplicaciones segmentarias (SD), transposones (LTR, TE, ADN TE), expresión genética y sintenia.

    PB-empalme-alternativo-de-ARN-de-longitud-completa

    Identificación del cromosoma Y y gen candidato a la determinación del sexo.

     
    Referencia

    Zhang, X., et al."Los genomas del baniano y la avispa polinizadora proporcionan información sobre la coevolución higo-avispa".Celda 183.4(2020).

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